1 材料与方法

1.1 受试药物

应激宁，批号：20190725，由武汉华扬动物药业有限责任公司提供。

1.2 实验动物

6周龄清洁级Wistar大鼠80只，雌雄各半，体重公鼠在130～150g之间，母鼠在120～140g之间，由扬州大学比较医学中心提供。动物生产许可证号：SCXK（苏）2012-0004，使用许可证号：SYXK（苏）2012-0029。

1.3 实验分组

将80只Wistar大鼠随机分为4组，分别为应激宁高、中、低剂量组和空白对照组，每组20只，雌雄各半。组内动物个体体重相差应不超过平均体重的20%，组间平均体重相差不超过5%。

1.4 给药剂量及给药途径

由于急毒试验没有测出LD50，90d喂养试验的高剂量组按最大耐受剂量10g/Kg（根据90d喂养试验指导原则确定为靶动物摄入量的100倍，靶动物推荐的摄入量为100mg/kg，试验大鼠即100mg/Kg×100=10g/Kg），混饲给药，分为低，中，高剂量组及对照组。给药各组剂量分别定为：0.0g/KgBW，2.5g/KgBW，5.0g/KgBW，10g/KgBW，连续给药90d。

期间受试药物给予量按大鼠每日饲料摄入量折算为饲料中受试药物浓度。因此在喂养试验的前30d大鼠每日饲料摄入按体重的10%折算，即将应激宁分别按2.5%、5.0%和10.0%的浓度添加于由比较医学中心提供的大鼠全价饲料的原粉料中，经充分混匀后热挤压制成颗粒料喂养。在喂养试验的后60d大鼠每日饲料摄入按体重的8%折算，即将应激宁分别按3.125%、6.25%和12.5%的浓度添加于大鼠全价饲料的原粉料中，经充分混匀后热挤压制成颗粒料供喂养。（注计算说明：高剂量组，大鼠1Kg的每日饲料摄入量为1,000g×10%＝100g，大鼠1Kg应给予的应激宁剂量为10g，即1Kg大鼠每日摄入的100g饲料中应添加应激宁10g。因此，折算成浓度百分比为10%，其他剂量类推。）

1.5 试验期间临床观察

服药期间每天肉眼观察大鼠的一般行为（包括精神状态，行为活动，采食量，饮水量，毛色，对外反应，粪便等）、中毒及死亡情况；……