三碘甲腺原氨酸对根尖牙乳头干细胞成牙/骨向分化的影响及其机制的初步探究

2020-07-08夏翊博于金华

口腔医学 2020年6期

关键词：检测

夏翊博，于金华

根尖牙乳头干细胞(stem cell from apical papilla, SCAPs)是存在于牙根未发育完全牙齿根尖乳头的一种间充质干细胞[1]，其具有较强的分化能力，研究认为其是一种有潜力用于组织再生修复的种子细胞[2-4]。

甲状腺激素(thyroid hormones，TH)是一种重要的激素，其参与调控发育、代谢等重要过程。甲状腺功能亢进(以下简称甲亢)是在临床上十分常见的内分泌疾病，有着较大的患者群体[5-6]。血清中游离TH水平过高会产生一系列不利影响。临床、实验室及流行病学研究表明，甲亢可导致各种硬组织发育、代谢异常，如：颅缝早闭、牙齿发育异常等[7-8]。这提示我们，血清中游离TH水平过高可能会影响干细胞成牙/骨向分化。然而，高浓度的TH对 SCAPs的成牙/骨向分化能力是否有影响罕见文献报道。本实验将验证TH的主要生物活性形式——3,5,3′-三碘甲腺原氨酸(3,5,3′-triiodothyronine, T3)[9]对SCAPs成牙/骨向分化的影响，并对其机制进行初步的探究。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

3,5,3′-三碘甲腺原氨酸(Sigma,美国)，Ⅰ型胶原酶(Gbico，美国)，胰酶(Gbico，美国)，α-MEM(Hyclone，美国)，胎牛血清(Gbico，美国)，青-链霉素双抗(Gbico，美国)，CCK-8试剂盒(Dojindo，日本)，碱性磷酸酶活性检测试剂盒(建成，中国)，BCA试剂盒(建成，中国)，BCIP/NBT显色试剂盒(碧云天，中国)，RIPA裂解液(碧云天，中国)，SDS- PAGE 凝胶试剂盒(凯基，中国),SYBR Premix Ex Taq 试剂盒(大连宝生物工程有限公司)，Super-Signal West Pico化学发光底物(Thermo，美国)，茜素红染色液(Sigma,美国)，油红染色液(Solarbio，中国)，阿新蓝染色液(Solarbio，中国)，成骨诱导液(cyagen，美国)，成脂诱导液(cyagen，美国)，成骨诱导液(cyagen，美国)。