王琴

摘 要：本文从分离胶浓度、凝胶厚度和点样量方面对SDS-PAGE电泳法进行优化，探究最适合蜂蜜蛋白质分析的SDS-PAGE电泳条件，证明SDS-PAGE电泳法分析蛋白组学的可靠性，为蜂蜜新鲜度和真实性的鉴别提供参考依据。

关键词：蜂蜜;蛋白质;凝胶电泳

中图分类号：O658.9;S896.1 文献标识码：A 文章编号：1003-5168（2020）14-0129-03

Study on the Condition Optimization of SDS-PAGE Analysis of Protein Components in Honey

WANG Qin

（College of Pharmaceutical Engineering， Chongqing Chemical Industry Vocational College， Chongqing 401228）

Abstract： This paper optimized the SDS-PAGE electrophoresis method in terms of separation gel concentration， gel thickness and spot size， explored the SDS-PAGE electrophoresis conditions that were most suitable for honey protein analysis， and proved that the SDS-PAGE electrophoresis analysis was reliable Sex， provided a reference for the identification of honey freshness and authenticity.

Keywords： honey;protein;gel electrophoresis

蜂蜜是蜜蜂采集花蜜或者蜜露在蜂巢中经过充分酿造而成的天然甜物质，除富含糖类物质，还含有少量的蛋白质、氨基酸、维生素和酚酸类等活性成分[1]，因而具有药食两用的功效[2]，深受人们的喜爱。

我国是蜂蜜的生产和消费大国，市场上的蜂蜜主要是由中华蜜蜂和意大利蜜蜂酿制的，蜂蜜品质参差不齐，造假掺杂的现象较为普遍。蜂蜜中的蛋白质组分主要来自蜂种，少部分来源于蜜源植物。蜂蜜中的蛋白质会随着储藏时间逐渐降解[3]，也受到商业加工的破坏，蜂蜜的蛋白组分完整性可以判定蜂蜜的新鲜程度和真实性，进而反映蜂蜜质量的优劣。SDS-PAGE电泳法可以快速地得出蜂蜜的蛋白组分，可用于蜂蜜质量优劣的判断。本研究主要探究最适合蜂蜜蛋白质分析的SDS-PAGE电泳条件，验证SDS-PAGE电泳法分析蜂蜜蛋白质的可靠性。

1 试验材料与试剂

1.1 样品

油菜蜜，来源于重庆农家中华蜜蜂蜂蜜，未经加工处理。

1.2 试剂与仪器

主要试剂有氢氧化钠（NaOH）、三氯乙酸（TCA）、丙酮、β-巯基乙醇、过硫酸铵、1.5 mol/L Tris-HCl（pH 8.8）、1 mol/L Tris-HCl（pH 6.8）、10% SDS、5×SDS的上样缓冲液、考马斯亮藍染色液、脱色液。主要仪器有蛋白质电泳仪、彩色图像扫描仪、电子恒温水浴锅。

2 试验方法