丁雪梅，张晓君，刘 月，刘小曼，包国章，孙博兴

(1.吉林大学动物科学学院，吉林 长春 130062；2.吉林大学教育技术中心，吉林 长春 130012；3.吉林大学新能源与环境学院，吉林 长春 130012)

在研究植物生长发育过程以及植物对盐碱、低温、干旱等逆境胁迫响应的研究中，可溶性糖常常作为研究的主要指标[1-5].在诸多的可溶性糖提取方法中，与苯酚硫酸法、斐林试剂比色法及3、5-二硝基水杨酸比色法相比，蒽酮-硫酸比色法因为操作简单、显色稳定、重现性好等优点而被广泛应用[6-7].

提取溶液、提取温度、提取时间直接影响着可溶性糖的提取效果.以往采用蒽酮-硫酸比色法对可溶性糖进行提取的研究中，提取溶液有蒸馏水或80%乙醇溶液，提取温度有75℃，80℃或100℃，提取时间有30，60或80 min等[8-17]，至今未有一个统一标准.此外，试验设计方法通常只采用单因素多水平试验或正交试验设计.而星点设计具有实验次数少、精度高、预测性好等优点.为了得到快速、经济、高效的可溶性糖测定方法，本研究采用星点设计效应面法，考察了3个重要因素(乙醇体积分数、提取温度、提取时间)对可溶性糖含量的影响，旨在优选出最佳的可溶性糖提取工艺.

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料：紫花苜蓿(Medicagosativa)新鲜叶片，取自吉林大学农学部植物种质园.将叶片用纯化水清洗后用滤纸擦干，110℃杀青15 min，80℃烘干至恒重，粉碎，过0.45 mm分析筛.

1.2 方法

1.2.1 试验设计方法

采用星点设计效应面法，因素和水平见表1，按照表2开展实验方案.

表1 星点设计的因素和水平

表……