吕伟

（德州职业技术学院 山东德州 253000）

1 前言

自然界中含有丰富的微生物，其中，大肠菌群可发酵多种糖类并产酸、产气，是人和动物肠道中的栖居菌[1]。大肠杆菌在相当长的一段时间内被当作是正常肠道菌群的组成部分、非致病菌。直到20世纪中期，人们才认识到部分特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜幼禽，会引起严重腹泻和败血症[2]。具有病原性的大肠杆菌包括肠致病性大肠杆菌、肠产毒性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌等[3]。国家标准要求每1 000 mL饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100 mL中大肠菌群不得超过5个[4]。

2 材料与方法

2.1 材料与仪器

材料:食品加工实训室制作的果汁（已开封24h）；月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）；三糖铁（TSI）；无菌水。

仪器与设备:超净工作台；高压蒸汽灭菌锅；电炉；烧杯；天平；玻璃棒；锥形瓶；试管；小导管；接种环；生化培养箱。

2.2 实验方法

2.2.1 准备工作

配制LST培养基分装至试管，加入小导管，包扎；配制TSI琼脂培养基分装至试管中，每支试管加入培养基至试管的1/5，包扎；准备1支10%mL移液管、4支1 mL移液管包扎；3支试管中加入9 mL生理盐水包扎；准备带塞的取样器皿包扎；将上述物品在121℃，15 min条件下灭菌。

2.2.2 取样

取样人员双手消毒，使用75%酒精对样品外包装口部进行消毒。用备好的无菌取样器皿取样约100mL。

2.2.3 样品处理

对双手和工作台进行消毒，使用10 mL无菌移液管移取25 mL样品至225 mL无菌缓冲液中摇匀，制成浓度10-1的待测液。用1 mL无菌移液管在10-1待测液中移取1 mL溶液加入9 mL无菌水中摇匀制成浓度为10-2的待测液，同理制成10-3的待测液。……