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培养基加氟后渗透压变化对成釉细胞超微结构影响的观察

2020-07-01张乐王垚王军强曹伟靖张学武

实用口腔医学杂志 2020年1期

张乐 王垚 王军强 曹伟靖 张学武

成釉细胞(ameloblast)是牙釉质形成的关键细胞[1],来源于牙胚内釉上皮。成釉细胞对氟十分敏感,目前认为过量的氟作用于成釉细胞,可造成细胞的形态结构改变,基质分泌异常,功能障碍,继而引起牙齿的发育和矿化障碍,导致氟牙症的形成。

现阶段获得成釉细胞主要方法来源于体外培养,培养体外细胞的过程中,培养基的渗透压需保持在一定的平衡范围内。如果渗透压发生变化,平衡被打破会造成细胞生物学特性异常。前期,本课题组已成功制备染氟的成釉细胞[2],由此发现体外染氟成釉细胞的一系列生物学特性发生变化。为明确这种变化的真正原因,我们在前期实验中初步发现加入氟化钠、氯化钠等渗透压调节剂后可使培养基的渗透压发生变化,这种变化对成釉细胞的形态方面未见明显影响[3]。本研究将继续通过观察成釉细胞于不同环境中的超微结构,明晰渗透压对成釉细胞生物学特性的是否有影响。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料与仪器

健康的出生4 d的SD大鼠(西安交通大学实验动物中心);透射电子显微镜(H-7650*,日本);全自动冰点渗透压仪(ONE-TEN OSMOMETER,德国);50 mOsm/kg 和850 mOsm/kg 氯化钠标准定标液、NaCl、KCl、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、NaOH、Na2EDTA·2H2O、溴酚兰、二甲苯(西安化学试剂厂);醋酸(天津市河东区红岩试剂厂);胶原酶、胰酶、明胶(Sigma公司,美国);DMEM(Hyclone公司,美国);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司);甘油(西安交通大学法医实验室惠赠)。

1.2 实验方法

1.2.1 实验组设置 通过本课题组前期预实验和查阅文献资料[2-3],实验选取0 mg/L氟化钠,42 mg/L氟化钠,84 mg/L 氟化钠3 组。……

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