摘 要 以不同连（轮）作年限种植白肉灵芝的温室土壤为实验材料，研究不同连（轮）作年限土壤真菌多样性的变化趋势。通过高通量测序技术并结合相关生物信息学方法，分析土壤中真菌ITS1+ITS2区域的丰富度、多样性指数以及群落结构。结果表明，连作或轮作后均能够提高微生物群落多样性，子囊菌门、担子菌门及接合菌门为优势真菌，担子菌门的比例随连作年限的增加而逐渐增加，轮作后丰度降低。

关键词 白肉灵芝;真菌;多样性

中图分类号：S154.3 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.09.093

土壤中的微生物主要通过吸收和转化的途径影响养分的利用，而造成土壤营养水平低下及产品产量、质量下降的原因则可能是微生物种群发生了变化[1]。产品连作年限较久会造成土壤中微生物种群结构单一化，从而造成土壤质量直线下降，土壤pH发生变化甚至于造成产品产量大减或者绝收。而造成产品减产的原因则主要是真菌，如尖孢镰刀菌、疫霉属及炭疽菌属等致病真菌。基于此，从真菌数量、种类等方面，研究连作和轮作对土壤中真菌多样性的影响，为连作障碍提供理论依据[2-3]。

1 材料与方法

1.1 时间与地点

试验于2019年3—8月在西藏自治区现代农业产业示范园区温室大棚进行。

1.2 试验材料

5个相邻的温室：1）多年未种植白肉灵芝;2）连作白肉灵芝2年;3）连作白肉灵芝2年后轮作种植羊肚菌;4）连作白肉灵芝3年后轮作种植蒜苗;5）连作白肉灵芝3年后换土。

试剂盒：E.Z.N.A.?Soil DNA Kit。

1.3 取样及保存

5个温室分别在白肉灵芝未种植及种植后分时间段采取土壤样品于-20℃冷冻保存。……