贾翼 邓晗 马泽刚

[摘要] 目的 探讨大麻素Ⅱ型受体（CB2受体）激活对1-甲基-4-苯基-吡啶离子（MPP+）诱导原代星形胶质细胞炎症反应的影响。方法 培养原代星形胶质细胞，生长状态良好时将其分为Control组、MPP+组、JWH133（CB2受体激动剂）+MPP+组、AM630（CB2受体抑制剂）+JWH133+MPP+组。应用免疫印迹法（Western Blot）检测Control组和MPP+组细胞CB2受体蛋白的表达。应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测各组环氧化酶2（COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因的表达。结果 与Control组相比，MPP+组的CB2受体蛋白表达上升（F=29.78，P<0.01）。与Control组比较，MPP+组COX-2和iNOS基因的表达明显上调（F=22.59、11.27，q=10.13、5.57，P<0.01）;JWH133预处理抑制MPP+诱导的COX-2和iNOS基因表达的上调（q=6.26、4.16，P<0.05）;此抑制作用可被AM630所阻断（q=5.34、5.67，P<0.01）。结论 激活CB2受体可抑制MPP+诱导的原代星形胶质细胞炎症反应。

[关键词] 受体，大麻酚，CB2;大麻素受体激动剂;1-甲基-4-苯基吡啶;星形细胞;环氧化酶2;一氧化氮合酶Ⅱ型

[中图分类号] R338.2  [文献标志码] A  [文章编号] 2096-5532（2020）02-0156-05

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.071 [开放科学（资源服务）标识码（OSID）]

[网络出版] http：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200417.0907.003.html;2020-04-18 15：26

[ABSTRACT] Objective To investigate the effect of cannabinoid 2 receptor （CB2 receptor） on 1-methyl-4-phenylpyridinium （MPP+）-induced inflammatory response in primary cultured astrocytes.  Methods Primary cultured astrocytes were cultured and divided into Control group， MPP+ group， JWH133 （CB2 receptor agonist）+MPP+ group， and AM630 （CB2 receptor antagonist）+JWH133+MPP+ group when growing well. Western blotting was used to determine the protein expression of CB2 receptor in Control group and MPP+ group. Quantitative real-time PCR was performed to measure the mRNA expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） and inducible nitric oxide synthase （iNOS）.  Results Compared with Control group， the MPP+ group had significantly up-regulated CB2 receptor protein expression （F=29.78，P<0.01） and significantly up-regulated COX-2 and iNOS mRNA expression （F=22.59，11.27;q=10.13，5.57;P<0.01）. JWH133 pre-treatment significantly inhibited the up-regulated mRNA expression of COX-2 and iNOS induced by MPP+ （q=6.26，4.16;P<0.01）， while this was blocked by CB2 receptor antagonist AM630 （q=5.34，5.67;P<0.01）.  Conclusion Activation of CB2 receptor can inhibit MPP+-induced inflammatory response in primary cultured astrocytes.

[KEY WORDS] receptor， cannabinoid， CB2; cannabinoid receptor agonists; 1-methyl-4-phenylpyridinium; astrocytes; cyclooxygenase 2; nitric oxide synthase type Ⅱ

星形膠质细胞是中枢神经系统中数量最多的一类神经胶质细胞，它们在维持细胞外液动力学、调节神经递质代谢、促进神经再生和修复中起重要的作用[1]，在帕金森病（PD）的发生发展中也具有重要作用[2]。PD是一种常见的神经变性疾病，其病理特征为黑质致密部多巴胺（DA）能神经元的选择性缺失[3]。神经炎症则是PD神经变性的主要因素之一[4]。在病理情况下，过度活化的星形胶质细胞释放一系列炎性递质，如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、环氧化酶2（COX-2）[5]和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）等，可以引起神经炎症[6]，并激活小胶质细胞继续释放炎性递质加重神经炎症，从而诱导神经元死亡[7-8]。因此，有效抑制星形胶质细胞的活化和炎性因子的释放对于PD的治疗有重要意义。大麻素Ⅱ型受体（CB2受体）是一种G蛋白耦联受体[9]，大量研究表明CB2受体在中枢神经系统疾病的发病中起重要作用[10-11]。……