董 浩，韩 焘，毕一鸣，原 霖，彭小薇，蒋 卉，冯 宇，吴同垒，秦玉明，王传彬

（1.中国动物疫病预防控制中心，北京 102618；2.中国兽医药品监察所，北京 102600；3.河北科技师范学院，河北秦皇岛 066000）

布鲁氏菌病（以下简称布病）是一种危害严重的人兽共患病，曾在全球160 多个国家或地区流行，被世界动物卫生组织（OIE）列为须通报动物疫病，是我国的二类动物疫病。近年来，随着我国牛羊养殖量的快速增加，以及牲畜调运的日益频繁，人间和畜间布病流行情况有加重趋势[1]。

畜间布病检测以血清学检测方法为主，但由于现有血清学检测方法与大肠杆菌O157、耶尔森菌O9 等菌株存在交叉反应，且无法区分免疫抗体与自然感染抗体，所以布病的血清学检测方法存在一定的局限性，而分子诊断技术以其快速、灵敏的特点备受青睐。OIE 在《陆生动物诊断与疫苗手册》中将普通PCR 和荧光定量PCR 技术均列为推荐的布病诊断方法。我国目前也有多种分子诊断类的检测方法被列入国家标准和行业标准。现行国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T18646—2018）中收录了Bruce-Ladder 多重PCR方法，其可以对布鲁氏菌进行分子分型。现行行业标准《奶牛布鲁氏菌病PCR 诊断技术》（NY/T 1467—2007）中采用的套式PCR 方法，进一步提升了PCR 方法的敏感性。《国境口岸布鲁氏菌荧光PCR 检测方法》（SN/T 4463—2016）适用于国境口岸的人或动物以及被布鲁氏菌污染物品的布鲁氏菌荧光定量PCR 检测。

目前，研究者们对布鲁氏菌的分子诊断实验方法开展了大量研究，如荧光定量PCR、等温扩增技术和数字PCR 技术等[2-4]，但对于分子诊断上游的核酸提取相关研究较少。……