付小琼，李超，刘逢举，刘媛，彭军

（中国农业科学院棉花研究所/ 棉花生物学国家重点实验室，河南安阳455000）

植物DNA 的提取是开展分子生物学试验的基础，一般应用低温保鲜方法如液氮或冰袋保存植物叶片，防止DNA 的降解和氧化，但携带均不方便。近年来硅胶干燥法是研究人员贮藏植物组织时最常用的方法，效果较好[1-3]，但是一般需要干燥48 h，中间还需要更换干燥剂，操作比较麻烦。 目前急需1 种可以快速烘干植物叶片提取DNA 的方法。 本研究采用微波炉干燥叶片的方法处理新鲜棉叶，用干燥后的棉叶提取DNA 并开展了后续的试验，效果较好。

1 材料与方法

1.1 材料

棉花品种GK102 和石抗126 于2015 年种植于中国农业科学院棉花研究所东场（河南省安阳县白璧镇）试验地。

1.2 微波炉型号

微波炉为格兰仕集团产品，型号为G80F23N1PM8，微波炉的工作频率为2 450 MHz。

1.3 处理方法

分别用棉花平展子叶、未平展的真叶（未展真叶）、平展的嫩叶以及平展的成熟叶作为试验材料，用微波炉不同的火力烘干，低火烘10 min，中火烘6 min，高火烘4 min。

1.4 DNA 的提取方法及简单序列重复（Simple sequence repeat,SSR）引物检测

参考付小琼[4]方法进行DNA 的提取，稍加改进， 取干叶50 mg， 水浴时间延长至60 min 左右，DNA 烘干后溶解于100μLddH2O。所得DNA 用4 对SSR 核心引物（表1）扩增，检测DNA 扩增的效果。

表1 SSR 引物序列

1.5 DNA 质量检测

利用1%（质量分数，下同）琼脂糖凝胶电泳和超微量分光光度计NanoDrop 2000 检测DNA 的质量浓度和纯度。

2 结果与分析

2.1 利用微波炉中火烘干真叶的试验结果

采集GK102 未展真叶、 平展嫩叶和平展成熟叶，在微波炉中用中火烘干后提取DNA。……