王昱霁 朱婉萍

1 浙江中医药大学 浙江 杭州 310053

2 浙江省中医药研究院 浙江 杭州 310007

本研究利用微波辅助法，提取南方红豆杉枝叶中的黄酮类化合物，在单因素试验的基础上采用响应面法优化提取工艺，以期获得较高的提取得率。为后续研究南方红豆杉中的黄酮类化合物或其他有效成分，为提高南方红豆杉资源的综合利用率提供实验基础和参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器：南方红豆杉枝叶（宁波泰康红豆杉生物工程有限公司提供），清洗晒干粉碎并过50目筛；芦丁对照品（中国食品药品检定研究院）；无水乙醇、亚硝酸钠、氢氧化钠等试剂，均为分析纯级。MAS-II PLUS微波萃取工作站（宁波新芝生物科技股份有限公司）；UV1800型可见紫外分光光度计（岛津）；MS204分析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]。

1.2 芦丁标准曲线的绘制：采用NaNO2-Al(NO3)3比色法[1]绘制标准曲线。称取在105℃下干燥至质量恒定的10mg芦丁标准品，置于25ml容量瓶中，用65%乙醇溶液溶解并定容，配制成浓度为0.4mg/ml的芦丁标准溶液。准确移取芦丁标准溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加65%乙醇至5ml，依次加入 5%NaNO2溶液 0.3ml，摇匀，放置 6min；加 10%Al(NO3)3溶液0.3ml，摇匀，放置6min；加入4%NaOH溶液4ml，摇匀，放置15min，再定容至10ml。以不加芦丁对照品溶液同法操作得到的溶液作为空白对照，全波段扫描，找到吸收度最大波长，在最大波长处测定吸收度。

1.3 南方红豆杉总黄酮的提取和吸光度测定：称取粉碎并过50目筛的南方红豆杉粉末5g，装入四颈瓶，加入不同浓度的乙醇溶液为溶剂，在不同提取条件下，利用微波萃取工作站进行微波辅助提取，提取后离心（2500 r/min，10min），取上清，补足加入溶剂的量后，得到南方红豆杉总黄酮待测液。……