冯刚 李向阳

摘要： 目的 探讨虾青素油对小鼠免疫调节作用。方法 测定刀豆蛋白 A（ConA）诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力，二硝基氟苯（DNFB）诱导的小鼠迟发性变态反应 （DTH），小鼠血清溶血素含量，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能，小鼠碳廓清能力，抗体生成细胞能力，小鼠自然杀伤细胞（NK）活性指標。结果与空白对照组比较，虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白 A（ConA）诱导的脾淋巴细胞增殖能力（0D值）显著增强（P<0.05） ，血清溶血素含量显著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指数显著提高（P<0.01）;高剂量组小鼠二硝基氟苯（DNFB）诱发的DTH显著增强（P<0.05）;虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化（P<0.05），抗体生成细胞能力未明显增强（P<0.05），自然杀伤（NK）细胞活性未明显增强（P>0.05）。结论虾青素油具有增强免疫功能的作用。

关键词： 虾青素油; 细胞免疫; 体液免疫;NK细胞

雨生红球藻属于绿藻门（Chlorophata）绿藻纲（hlorophyceae）团藻目（Volvocales）红球藻科（Haematococcaccae）红球藻属（Haematococcus，Ag）。雨生红球藻细胞内天然虾青素的含量相对较高，可达干重的2%～5%[1]。虾青素是一种叶黄素类胡萝卜素。是迄今为止人类发现的自然界最强的抗氧化剂之一，其清除自由基的能力是天然维生素E 的1000倍，是天然β-胡萝卜素的10倍，是番茄红素的7倍。

通过整体实验观察，发现虾青素等类胡萝素均显著促进胸腺依赖抗原（TD-Ag）刺激时的抗体产生，分泌IgM和IgG的细胞数增加[2]。Jyonochi等[3]研究了虾青素和β-胡萝素2种类胡萝素对小鼠淋巴细胞体外组织培养系统的免疫调节效应，结果表明类胡萝素的免疫调节作用与有无VE活性无关。虾青素的抗氧化作用能够保持机体的自稳态，从而保证细胞间隙的连接通讯正常发挥作用，进而促进淋巴细胞间的相互作用并分泌有免疫活性的细胞因子，最终表现为机体免疫能力的增强[4]。今年来从雨生红球藻中提取虾青素得到虾青素油，虾青素油用于营养保健类产品开发研究逐渐增多。

本实验研究虾青素油对小鼠免疫调节作用。

1 材料与方法

1.1动物SPF级昆明种雌性小鼠160只，体质量18～22g，湖北省实验动物研究中心提供。

1.2受试物 虾青素油 批号20180124J，由上海莱雀生物科技有限公司提供，虾青素含量5.10%

1.3主要仪器 动物天平、分析天平、水浴锅、酶标仪、96孔细胞培养板、离心机、游标卡尺等

1.4实验分组及剂量 160只小鼠随机分为四个大组，分别进行迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK细胞活性实验。四个大组再分成4个小组，虾青素油高、中、低剂量组和对照组。剂量组分别灌胃虾青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW，对照组灌胃等体积大豆油。每日1次，灌胃体积为0.1ml/10g，连续30天。

2 方法

动物适应环境5天后，三个剂量组分别灌胃虾青素油8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和51mg/kg·BW，对照组灌胃等体积大豆油。每日1次，灌胃体积为0.1ml/10g，连续30天后处死小鼠。按照中国卫生部《保健食品审评与评价技术规范》2003版中“增强免疫功能实验检测方法”有关规定进行迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞;小鼠碳廓清;小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK细胞活性实验。

数据处理 采用 SAS 软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差表示，行t 检验。P<0.05 为差异有统计学意义。

3实验结果

结果见表1至表3。各组动物间体重增重、胸腺/体质量比值和脾脏/体质量比值无明显差异（P>0.05）。与空白对照组比较，虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白 A（ConA）诱导的脾淋巴细胞增殖能力（0D值）显著增强（P<0.05） ，血清溶血素含量显著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指数显著提高（P<0.01），高剂量组小鼠二硝基氟苯（DNFB）诱发的DTH 显著增强（P<0.05）;虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化（P<0.05） ，抗体生成细胞能力未明显增强（P<0.05），自然杀伤（NK）细胞活性未明显增强（ P>0.05）。

3讨论

本实验显示，各组动物间体重增重、胸腺/体质量比值和脾脏/体质量比值无明显差异（P>0.05）。与空白对照组比较，虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白 A（ConA）诱导的脾淋巴细胞增殖能力（0D值）显著增强（P<0.05） ，血清溶血素含量显著升高（P<0.05），小鼠碳廓清吞噬指数显著提高（P<0.01），高剂量组小鼠二硝基氟苯（DNFB）诱发的DTH 显著增强（P<0.05）;虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化（P<0.05） ，抗体生成细胞能力未明显增强（P<0.05），自然杀伤（NK）细胞活性未明显增强（ P>0.05）。表明虾青素油对小鼠免疫调节具有正向作用，可提高小鼠免疫能力。

引用文献

1. 曹平华，李晓霞，禹学礼，等.雨生红球藻.饲料博览.2004年第11期：42-43

2.JyonouchiH.Zhang I，Gross M eta1.Nutr.Cancer1994，21（1）：47

3.JyonouchiH.Hill R J.Tomita Yeta1 Nutr.Cancer.1991，16（2）：93～105

4.陈立武，曾维铨.虾青素抗肝肿瘤生长的实验研究.2012年2月，第9卷第4期：21-23