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尿液巨细胞病毒DNA检测在诊断婴幼儿巨细胞病毒感染应用中的价值

2020-05-21留静付金龙

浙江临床医学 2020年4期
关键词:一致性检测

留静 付金龙

人 类 巨 细 胞 病 毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是引起围产儿感染最常见的病毒。HCMV侵入人体后可在宿主体内长期持续存在,免疫正常的个体感染HCMV后多无临床表现,但在免疫机制发育不成熟的胎儿、婴幼儿和其他免疫抑制个体中可侵袭多个器官、系统而产生严重疾病,且人群易感性年龄愈小,易感性愈高,症状也愈重[1]。因此,临床及早诊断和治疗对疾病的控制和预后具有重要意义。目前临床检测HCMV的方法主要有:血清学特意性抗体检查、HCMV病毒抗原检测,病毒学培养检查、实时荧光定量PCR法等。病毒的分离与培养既耗时、在临床又难以开展,IgM和IgG抗体的检测结果在特定情况下也不可靠,而实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术是诊断HCMV感染的快速、有效方法。

1 材料与方法

1.1 一般资料 本文为回顾性分析,收集2017年1月至2018年12月间在浙江大学丽水医院就诊的疑似HCMV感染的患儿256例,设为观察组,其中男155例,女101例;年龄0~3岁。主要临床症状为新生儿高胆红素血症、婴儿肝炎综合征、肺炎、发热、呕吐及腹泻。并选取同期在医院体检的健康婴幼儿130例设为对照组。

1.2 方法 (1)标本采集和处理:取患儿空腹全血2ml分离胶真空管,颠倒混匀,及时分离血清(离心4000r/min,5min)待检。不能及时检测的标本4℃保存,同时留取3ml的小便标本,放4℃冰箱保存,进行HCMV-DNA检测;为保证检验质量,同一批次的标本均于24h内完成检验。(2)HCMV DNA测定:严格按试剂盒(美国PerkinElmer公司)说明书操作。将50μl处理后的尿液、乳汁、血细胞沉淀物,以及等量DNA提取液加入1.5ml离心管中,100℃加热10min,12000r/min离心5min取上清液2μl做PCR扩增。……

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