陈 卓，任 娜，楚 露，孟凯强，罗秋风，张 欣，刘继平

（陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046）

变应性鼻炎又叫过敏性鼻炎，是指由多种免疫活性细胞和细胞因子参与的鼻黏膜非感染性炎症性病变。相关的统计数据显示，目前全球已有超过5亿人罹患变应性鼻炎[1]。此病患者可出现打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、鼻痒、眼痒等症状。此病虽然不会威胁患者的生命安全，但可严重影响其生活、工作和学习。通窍鼻炎片是一种具有散风消炎、宣通鼻窍功效的中药制剂，常用于治疗鼻窦炎和变应性鼻炎。本研究以通窍鼻炎片的药方为基础，将该药方中的药材研磨成粉，探讨用通窍鼻炎药粉对变应性鼻炎大鼠进行治疗的效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康SD大鼠50只（购自空军军医大学动物实验中心，动物合格证书号为SCXK2017-0007），其体重为180～220 g。其中，雌性大鼠和雄性大鼠各有25只。

1.2 药品与试剂

通窍鼻炎药粉（制法是：取炒苍耳子120 g、防风90 g、黄芪 150 g、白芷 90 g、辛夷 90 g、炒白术 90 g、薄荷 30 g[2]。将这些药材研磨成粉，过80目筛，即得到通窍鼻炎药粉）、卵清蛋白OVA（品牌：BIOSS；货号：bs-1304P）、氢氧化铝（生产企业：上海科敏生物科技有限公司；货号：A110531）、浓度为0.5%的伊文思蓝染色液（生产企业：上海振誉生物科技有限公司；货号：BD0365）、大鼠免疫球蛋白E（IgE）试剂盒（生产企业：南京森贝伽生物科技有限公司；货号：SBJ-R0567）。

1.3 实验设备

BT224S电子天平（由赛多利斯科学仪器有限公司制造）、Eon全波长酶标仪（由美国Bio-Tek公司制造）、TGL-16M台式高速离心机（由湖南湘仪实验仪器开发有限公司制造）、微量移液器（由上海求精生化试剂仪器有限公司制造）。

1.4 实验方法

1.4.1 动物分组与造模方法 将50只SD大鼠随机分为给药组（n=20）、对照组（n=20）和空白组（n=10）。用卵清蛋白和氢氧化铝为给药组大鼠与对照组大鼠建立变应性鼻炎大鼠模型，造模过程包括基础致敏阶段和强化致敏阶段[3]。基础致敏阶段：在0.3 mg的卵清蛋白和30 mg的氢氧化铝中加入1 ml的生理盐水，制成混悬液。将该混悬液注入到给药组大鼠与对照组大鼠的腹腔内，向空白组大鼠的腹腔内注入1 ml的生理盐水，每隔1天注射1次，共注射7次。强化致敏阶段：在造模的第14天～第20天，向给药组大鼠与对照组大鼠的鼻腔内滴入浓度为0.5%的卵清蛋白生理盐水，每个鼻孔各滴入0.05 ml，向空白组大鼠的双侧鼻腔内各滴入0.05 ml的生理盐水，每天滴入1次，共滴入7次。每次致敏后30 min（指向大鼠的腹腔内注药或向其鼻腔内滴药后30 min），注意观察大鼠打喷嚏、流鼻涕和抓鼻的情况，并采用叠加量化计分法对其打喷嚏、流鼻涕和抓鼻情况的严重程度进行计分（每个症状的分值均为0～3分，总分为9分）。若对照组大鼠与给药组大鼠上述症状的积分超过5分，即表示造模成功[4]。具体的计分方法详见表1。

1.4.2 给药方法 自造模成功的第14天开始，向给药组大鼠的鼻腔内喷入通窍鼻炎药粉，共用药7 d。在此期间，持续向给药组大鼠与对照组大鼠的鼻腔内滴入卵清蛋白生理盐水，持续向空白组大鼠的鼻腔内滴入生理盐水。

表1 大鼠打喷嚏、流鼻涕、抓鼻情况严重程度的计分方法

1.5 观察指标

造模1～7 d后，观察三组大鼠打喷嚏、流鼻涕和抓鼻的情况，计算其上述三项症状的积分，具体的计分方法参照表1。给药1～7 d后，观察三组大鼠致敏后30 min内打喷嚏的次数。给药1～7 d后，观察三组大鼠打喷嚏、流鼻涕和抓鼻情况，计算其述三项症状的积分，具体的计分方法参照表1。末次给药后，在三组大鼠中各选取6只大鼠，抽取其尾静脉血10 ml。对血液标本进行进行离心处理，分离出血清，用双抗夹心法测定血清中IgE的水平。末次给药后，在三组大鼠中各选取6只大鼠，摘取其鼻黏膜。用石蜡对鼻黏膜进行包埋，将其制备成直径为4 μm的鼻黏膜病理切片，并对切面进行染色处理。在光镜下观察鼻黏膜病理切片中嗜酸性粒细胞（EOS）的数量。

1.6 统计学方法

用SPSS 13.0软件处理本研究中的数据，计数资料用%表示，用χ²检验，计量资料用均数±标准差（）表示，用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 造模1～7 d后三组大鼠的症状积分

造模6 d后及7 d后，对照组大鼠与给药组大鼠的症状积分均≥5分，表示造模成功。详见表2。

表2 造模1～7 d后三组大鼠的症状积分（分）

2.2 给药1～7 d后三组大鼠致敏后30 min内打喷嚏的次数

给药1～7 d后，空白组大鼠致敏后30 min内打喷嚏的次数均少于给药组大鼠与对照组大鼠。给药1～7 d后，给药组大鼠致敏后30 min内打喷嚏的次数均少于对照组大鼠。从给药第3天开始，给药组大鼠致敏后30 min内打喷嚏的次数均稳定在20次以内。详见图1。

2.3 给药1～7 d后三组大鼠的症状积分

给药1～2 d后，对照组大鼠与给药组大鼠的症状积分均高于空白组大鼠，P＜0.05。给药3～7 d后，对照组大鼠的症状积分均高于空白组大鼠与给药组大鼠，P＜0.05。给药3～7 d后，空白组大鼠与给药组大鼠的症状积分相比，P＞0.05。详见表3。

2.4 末次给药后三组大鼠血清IgE的水平

末次给药后，对照组大鼠血清IgE的水平高于空白组大鼠与给药组大鼠，P＜0.05。末次给药后，空白组大鼠与给药组大鼠血清IgE的水平相比，P＞0.05。详见表4。

2.5 末次给药后三组大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的数量

末次给药后，对照组大鼠与给药组大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的数量均多于空白组大鼠，P＜0.05。末次给药后，给药组大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的数量少于对照组大鼠，P＞0.05。详见表5。

表3 给药1～7 d后三组大鼠的症状积分（分，）

表3 给药1～7 d后三组大鼠的症状积分（分，）

注：*与空白组相比，P＜0.05；#与空白组、给药组相比，P＜0.05；×与空白组相比，P＞0.05。

组别 只数 给药1 d后 给药2 d后 给药3 d后 给药4 d后 给药5 d后 给药6 d后 给药7 d后空白组 10 2.00±1.25 2.50±1.43 3.20±1.23 2.70±1.06 2.60±1.60 2.80±1.46 2.90±0.57对照组 20 6.00±1.26* 5.95±1.10* 6.00±0.86# 6.10±1.33# 6.00±1.34# 6.11±1.24# 6.05±1.39#给药组 20 6.00±1.03* 5.05±1.82* 2.45±1.32× 2.50±1.24× 2.00±0.79× 3.25±1.57× 3.00±1.81×

表4 末次给药后三组大鼠血清IgE的水平（ng/ml，）

表4 末次给药后三组大鼠血清IgE的水平（ng/ml，）

注：*与空白组、给药组相比，P＜0.05；#与空白组相比，P＞0.05。

组别 只数 血清IgE空白组 6 2.18±1.31对照组 6 3.69±1.28*给药组 6 2.11±1.70#

表5 末次给药后三组大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的数量（个，）

表5 末次给药后三组大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的数量（个，）

注：*与空白组相比，P＜0.05；#与对照组相比，P＞0.05。

组别 只数 鼻黏膜病理切片中EOS的数量空白组 6 2.00±0.36对照组 6 4.67±0.58*给药组 6 4.03±1.15*#

3 讨论

人鼻黏膜的表面积约为150 cm2，且鼻黏膜的表面存在大量的微绒毛。临床研究表明，在对变应性鼻炎患者进行治疗时，向其鼻腔内给药可使药物直接作用于鼻黏膜，能避免药物在其肝脏内出现首过效应，进而可提高药物的吸收速度和生物利用度[5]。另外，药粉还可在患者的鼻黏膜外形成一层隔离防护膜，能减少外界致敏源与其鼻黏膜发生直接接触，进而可减轻其过敏反应[6]。本研究所用的通窍鼻炎药粉中，苍耳子可散风除湿、通窍止痛，防风可祛风止痒，黄芪可补气、排脓，白芷可活血排脓，辛夷可散风寒、通鼻窍，白术可健脾益气、燥湿利水，薄荷可疏肝理气、利咽止痒。上述诸药合用，可共奏散风消炎、宣通鼻窍之功。

综上所述，用通窍鼻炎药粉对变应性鼻炎大鼠进行治疗的效果显著，能有效地缓解其打喷嚏、流鼻涕等症状，降低其血清IgE的水平。