张建荣

摘要：目的：研究甲醇对α-淀粉酶活性及构象的影响。方法：拟合米氏方程求得Km.Vmax，并探讨甲醇对α-淀粉酶的活性影响。结果：以0.5%的淀粉为底物，加甲醇时km=0.265mol/L，Vmax=88.496U/min.g，不加甲醇时km=0.0442m01/L，Vmax=88.495U/min.g，由此可知甲醇浓度在10%-50%范围内时，其对α-淀粉酶具有抑制作用。结论：本实验为进一步研究淀粉酶抑制剂提供理论基础。

关键词：淀粉;麦芽糖;α-淀粉酶;抑制剂

α-淀粉酶主要催化断开淀粉中α-，4糖苷鍵，并具有淀粉的液化和糖化作用，α-淀粉酶是影响饮食中淀粉等消化、吸收的关键酶，抑制其活性可以延缓人体对淀粉的降解和葡萄糖的吸收，从而抑制餐后血糖的快速升高。因此α-淀粉酶抑制剂常被用于治疗糖尿病。由于寻求α-淀粉酶抑制剂的成本高，人们更多地从廉价的化学药品中寻找高效的α-淀粉酶抑制剂，因此成为研究的热门话题。在研究α-淀粉酶的基础上，本研究主要探讨甲醇对α-淀粉酶的抑制效果。

一、材料与设备

（一）材料

磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、淀粉、麦芽糖、α-淀粉酶、甲醇、DNS、蒸馏水。

（二）设备

电热恒温水浴锅（HH-S4型）：北京科伟永兴仪器有限公司;岛津分析天平（AUY220）、UV-250：日本岛津;722可见分光光度计;PHS-3D雷磁PH计：上海精科。

二、研究方法

（一）麦芽糖标准曲线的制作

取8支干净的试管，量取1mg/ml的麦芽糖，体积（m1）分别为0，0.2，0.6，1.0，1.4，1.8，2.0，在37℃下保温3min，再加入DNS试剂2ml，沸水浴5min，流水冷却，蒸馏水定容至25m1，在540nm处测OD值。

（二）α-淀粉酶活性的测定

1.取5支干净的试管，分别编号1-5。

2.准确量取0.5%的淀粉0.5ml于5个试管中，每个试管中加入对应的甲醇浓度为10%，20%，30%，40%，50%，样品管中分别加入……