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金属酞菁-血清白蛋白杂化酶的合成及其性质的研究

2020-05-08赵丹丹张恩风莫丹白丽娟张玉贞边贺东

应用化工 2020年3期

赵丹丹,张恩风,莫丹,白丽娟,张玉贞,边贺东

(广西民族大学 化学化工学院 广西林产化学与工程重点实验室,广西 南宁 530006)

酞菁中心位置的空腔内有四个氮原子,容易和金属元素发生配位作用,形成具有特殊颜色的配合物,俗称金属酞菁[1]。酞菁分子中含有18π电子,因其特殊的结构,具有良好的稳定性[2]。由于金属酞菁在有机溶剂和水中的溶解性较小,研究者发现在酞菁环上引入取代基,如 —COOH、—SO3H等均能有效增强酞菁在水中的溶解度[3]。

血清白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质,易和药物分子以分子间力相结合,常作为载体来研究[4]。通过苯酐-尿素法合成了八羧基酞菁锰(MnOCPc)和八羧基酞菁铁(FeOCPc)。在模拟人体生理条件下,使用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色光谱等方法,研究了MnOCPc、FeOCPc与BSA 的相互作用。研究了金属酞菁及金属酞菁-BSA杂化蛋白SOD活性[5]。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

均苯四甲酸酐、尿素、钼酸铵、牛血清白蛋白(BSA,分子量为66 210)、氯化铁、氯化锰、黄嘌呤氧化酶(XOD)、黄嘌呤(XO)、氯化硝基四氮唑兰(NBT)、超氧化物歧化酶(SOD)、氯化钠、乙醇、磷酸盐等均为分析纯;实验用水均为二次去离子水。

Perkkin Elmer instruments Spectrum One红外分光光度计;RF-5301 型荧光分光光度计;Jasco-810圆二色谱仪;HX-HH420A4超级恒温水浴箱;Cary100紫外-可见分光光度计;DF-101S 集热式恒温加热磁力搅拌器;arium Pro 超纯水系统。

1.2 溶液配制

配制浓度为 0.05 mol/L,pH=7.43的磷酸盐缓冲溶液(PBS),其中含有NaCl的浓度为0.1 mol/L;以PBS缓冲溶液配制牛血清白蛋白储存液(1.0×10-3mol/L),并保存于4 ℃,用前稀释。实验中NaCl的浓度均保持在0.1 mol/L,用以维持离子强度。

1.3 金属酞菁的合成

八羧基酞菁锰(MnOCPc)和八羧基酞菁铁(FeOCPc)的制备参照文献[6],所得产率分别为18%和20%。……

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