李肖妹 冯王富 姚靖

【摘要】 目的：探究血紅蛋白（Hb）电泳与平均红细胞体积（MCV）对新生儿地中海贫血筛查的临床诊断效果。方法：选取2018年1月-2019年6月本院收治的疑似地中海贫血患儿352例，其中基因检测阳性的218例作为地贫组，另选取同期本院体检的健康新生儿85例作为对照组。所有研究对象均行Hb电泳及MCV检测。比较两组血液学检测指标;比较不同类型地中海贫血者血液学检测指标;以基因检测作为金标准，比较Hb电泳、MCV单独检测和两者联合检测的敏感度、特异度及准确性。结果：地贫组MCV、HbA均明显低于对照组，而HbF明显高于对照组（P<0.05）;α-地中海贫血者MCV、HbF均明显低于β-地中海贫血者，而HbA明显高于β-地中海贫血者（P<0.05）;根据ROC曲线图显示，Hb电泳临界值为115 g/L，MCV临界值为58 fL，联合检测的敏感度、特异度及准确性均明显高于单独检测Hb电泳和MCV（P<0.05）。结论：Hb电泳、MCV检测在新生儿地中海贫血筛查中具有一定价值，两者联合检测的敏感度、特异度及准确性更高，对地中海贫血患儿早期诊断、治疗及预后具有重要意义。

【关键词】 Hb电泳 MCV 地中海贫血

[Abstract] Objective： To explore the clinical diagnostic effect of hemoglobin （Hb） electrophoresis and mean erythrocyte volume （MCV） on neonatal thalassemia screening. Method： A total of 352 children suspected of thalassaemia admitted to our hospital from January 2018 to June 2019 were selected， including 218 cases with positive gene test as the thalassaemia group. And 85 healthy newborns underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the control group. All subjects underwent Hb electrophoresis and MCV detection. The hematological test indicators were compared between the two groups. The hematological indicators of patients with different types of thalassemia were compared. Gene test was used as the gold standard to compare the sensitivity， specificity and accuracy of Hb electrophoresis， MCV alone and combined detection. Result： MCV and HbA in the thalassemia group were significantly lower than those in the control group， while HbF was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. The MCV and HbF of patients with α-thalassemia were significantly lower than those with β-thalassemia， while the HbA was significantly higher than those with β-thalassemia （P<0.05）. According to the ROC curve， the critical value of Hb electrophoresis was 115 g/L and the critical value of MCV was 58 fL. The sensitivity， specificity and accuracy of the combined detection were significantly higher than that of Hb electrophoresis and MCV detection alone （P<0.05）. Conclusion： Hb electrophoresis and MCV detection have certain value in screening neonatal thalassemia. The sensitivity， specificity and accuracy of combined detection of Hb electrophoresis and MCV are higher， which is of great significance for early diagnosis， treatment and prognosis of children with thalassemia.[Key words] Hb electrophoresis MCV ThalassemiaFirst-authors address： Maternal and Child Health Hospital of Yangjiang City， Yangjiang 529500， China

地中海贫血（地贫）又称海洋性贫血或珠蛋白生成障碍性贫血，是一种隐性基因遗传疾病，好发于新生儿，病因是遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理状态[1]。该病是全世界分布最广泛，发病人数最多的一种单基因病[2]。有相关统计数据显示，广西是我国地贫多发地，约20%人群为地贫携带者，其他发病率较高的地区还有广东、江西、四川及台湾等地区[3]。若不能有效筛查出地贫新生儿，则容易发生饮食不合理，盲目医治等情况[4]。当前地贫诊断的金标准为基因检测，但操作繁琐，设备要求高，价格昂贵，难以广泛开展。因此，寻找一种经济有效的筛查地贫患儿的方法显得十分重要。本文采用血红蛋白电泳与MCV对地贫患儿进行分析与诊断，探究这两者方法对地贫患儿筛查的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1月-2019年6月本院疑似地中海贫血患儿352例，纳入标准：在本院接受体检发现红细胞脆性<60%或红细胞分布宽度≤16%。排除标准：有其他贫血症者;有其他系统疾病者。其中经基因检测确诊为阳性的218例患儿作为地贫组，另选取同期本院体检的健康新生儿85例作为对照组。所有患儿家属均知情同意并签署知情同意书，本研究已经医院伦理委员会批准。

1.2 方法 抽取所有研究对象空腹状态下静脉血2～5 mL，放置于无菌试管中并做好标记，摇晃均匀后进行抗凝离心（参数：5 000 r/min，5 min）;去血浆后用10倍0.9%氯化钠溶液洗涤红细胞3次，取10 μL红细胞于装有130 μL溶血素的试管中摇匀，温室培育5 min备用。取抗凝静脉血2 mL，用Sysmex KX-21血液分析仪，严格依照说明书操作检测血液平均红细胞体积（MCV）;使用Hb电泳仪、扫描仪和分析系统检测Hb指标（包括HbA、HbF）。基因检测：取疑似地中海贫血患儿静脉血3 mL，采用人体细胞DNA提取试剂盒提取样本DNA，采用GAP-PCR结合反向斑点杂交法诊断α-地贫，采用PCR结合反向斑点杂交法诊断β-地贫，严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 观察指标及评价标准 （1）比较两组血液学指标，包括MCV、HbA及HbF;（2）比较不同类型地贫患儿血液学指标;（3）以基因检测为金标准，比较Hb电泳、MCV单独检测和两者联合检测诊断地贫的敏感度、特异度及准确性。MCV正常参考值为80 fL

1.4 统计学处理 采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，采用ROC曲线分析Hb电泳与MCV检测的截断值，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 地贫组男105例，女113例;孕周37～40周，平均（38.5±0.7）周，年龄3～34 d，平均（21.4±3.1）d;α型116例，β型102例。对照组男42例，女43例，孕周37～41周，平均（38.9±0.8）周，年龄2～35 d，平均（21.8±3.3）d。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组血液学检测结果比较 地贫组MCV与HbA均明显低于对照组，而HbF明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3 不同类型地贫患儿的血液学检测结果比较 α-地贫者MCV与HbF均明显低于β-地贫者，HbA明显高于β-地贫者，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.4 不同诊断方法对地贫的诊断价值 根据ROC曲线图显示，单独检测Hb电泳以临界值为115 g/L时;单独检测MCV临界值为58 fL;三种检测方法诊断地贫的敏感度、特异度及准确性比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。联合检测的敏感度、特异度及准确性均明显高于单独检测Hb电泳和MCV，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3，图1。

3 讨论

地贫是一组单基因遗传性疾病，最早出现于希腊、意大利等地中海沿岸国家，并由此而得名[5]。缘于基因缺陷的复杂性与多样性，使缺乏的珠蛋白链类型、数量及临床症状变异性较大。根据所缺乏的珠蛋白链种类，地贫可为α型、β型、δβ型和δ型4种，其中以α型、β型最为常见[6-7]。该病患病人数高，好发于新生儿，危害性大，且目前无特效治疗方法，地贫重症患儿仅可通过输血、药物等维持生命，但预后较差，发生较多不良反应和并发症等，生存质量下降[8-9]。当前，我国临床鉴定地贫主要是通过临床症状、实验室检查和基因检测，但由于检测条件、技术操作及检测价格较昂贵，基因检测难以广泛开展[10-12]。因此，探索一种广泛有效的筛查方法尤为重要。

Hb电泳是临床检测地贫的常用方法，具有快速、操作简单、特异度高等优点，能定量检测HbA、HbF而将患者分为α型或β型地貧[13]。但该方法易受检测试剂、样品处理等诸多因素干扰，出现误诊、漏诊等情况[14]。本研究结果显示，地贫组MCV、HbA均明显低于对照组，HbF明显高于对照组（P<0.05），α-地贫的MCV、HbF均明显低于β-地贫，HbA明显高于β-地贫（P<0.05），提示Hb电泳、MCV检测均可有效筛查地贫。且HbA在对照组中最高，α-地贫次之，β-地贫最低;HbF在β-地贫中最高，α-地贫次之，对照组最低，提示Hb电泳对地贫类型有一定程度的应用价值，原因在于Hb电泳通过分离不同等电点Hb并鉴定Hb的技术，但对轻度且无明显症状的地贫筛查效果不佳，因此只能一定程度上提示α型或β型地贫[15-17]。根据ROC曲线图显示，单独检测MCV特异度最低，原因在于地贫患儿MCV降低，且缺铁性贫血等情况也会发生MCV降低的状况，因而单独检测MCV对筛查地贫效果不佳[18-19]。Hb电泳+MCV联合检测的敏感度、特异度、准确性均明显高于单独检测Hb电泳和MCV（P<0.05），提示Hb电泳+MCV联合检测可更有效筛查出地贫。

综上所述，Hb电泳、MCV检测在新生儿地中海贫血筛查中具有一定价值，Hb电泳+MCV联合检测的敏感度、特异度及准确性更高，对地中海贫血患儿早期治疗及预后具有重大意义。

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（收稿日期：2019-09-04） （本文编辑：田婧）