尹宝英, 张 浩，张文娟

(1.咸阳职业技术学院 畜牧兽医研究所，咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室，陕西 咸阳 712000；2.陕西正大有限公司，陕西 咸阳 712000)

猪病毒性腹泻病是由一种或一种以上病毒感染猪只所引发的以腹泻为主的消化道功能障碍性疾病。国内研究报道显示2010年后引起仔猪腹泻致死的主要病毒是猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV)，该病毒临床上常与猪传染性胃肠炎病毒(transmissiblegastroenteritisvirus，TGEV) 和猪轮状病毒(porcinerotavirus，PRV)呈混合感染。主要临床症状表现为呕吐、腹泻、脱水甚至死亡，严重影响仔猪的健康发展。贵州、安徽省、河北省等规模化猪场的进行可疑病原检测结果显示PEDV感染仔猪最为严重，感性强，致死率高，阳性率高达为63.54%，存在与TGEV和PRV混合感染情况[1～6]。因此，笔者研究对2018年期间陕西部分规模化猪场送检的162例患有腹泻的仔猪病料进行病原检测，分析PEDV、TGEV与PRV三种病毒性腹泻在陕西的流行状况，以期为该类疾病的防控提供资料依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料来源 病料源自2018年陕西地区部分规模化养猪场的仔猪的肠道组织、内容物及粪便，共计162份。发病仔猪临床呈现呕吐，腹泻，脱水甚至死亡。病理剖检可见小肠扩张，肠腔内充满黄色液体，肠系膜淋巴结水肿，肠系膜充血。

1.1.2 主要试剂 病毒 RNA/DNA提取试剂盒、总RNA提取液、AMV 反转录酶、rTaq DNA 聚合酶、dNTP、Oligo( dT) 、RNA酶抑制剂、DNA Marker DL 2000购自宝生物工程( 大连) 有限公司。

1.1.3 引物设计 根据GenBank序列使用 Premier 5.0 生物软件设计PEDV、TGEV、PRV基因特异性引物序，引物合成由生工生物工程(上海)有限公司完成，详情见表1。……