蒙药材胡德日奈都日吉德的质量标准初步研究

2020-04-19包勒朝鲁那生桑

世界中医药 2020年5期

包勒朝鲁那生桑

摘要目的：建立蒙藥胡德日奈都日吉德的质量标准。方法：参照《中华人民共和国药典》（四部）2015年版相关方法，对胡德日奈都日吉德杂质、水分、灰分、浸出物进行检测;采用硅胶G薄层板，以大戟二烯醇为对照，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（10∶1）为展开剂，用10%硫酸乙醇溶液显色，对胡德日奈都日吉德进行鉴别;采用紫外分光光度法，以大戟二烯醇为对照，在545 nm波长下对胡德日奈都日吉德的活性成分萜类化合物进行定量分析。结果：胡德日奈都日吉德三批样品杂质在0.69%～0.75%之间，平均值为0.72%，RSD为4.26%;水分含量在7.68%～7.74%之间，平均值为7.72%，RSD为0.03%;总灰分0.20%～0.22%之间，平均值为0.21%，RSD为2.86%;酸不溶性灰分在0.21%～0.23%之间，平均值为0.22%，RSD为4.82%;浸出物1.24～1.35之间，平均值为1.31%，RSD为4.64%。在供试品的色谱中，与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。总萜在0.672 0～5.379 0 mg/L呈良好的线性关系，该方法平均回收率为97.48%，RSD为0.478%，3批样品总萜含量在25.67～35.94 mg/g之间，均含量为31.03 mg/g。结论：根据实验结果，制定蒙药胡德日奈都日吉德药材（按干燥品计算）中杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分分别不得过1%，10.0%，0.4%、0.4%;水溶性浸出物不得少于1.0%;总萜含量不得少于20 mg/g。本办法可用于蒙药胡德日奈都日吉德药材的质量控制。

关键词蒙药;胡德日奈都日吉德;大戟二烯醇;总萜;薄层色谱;含量测定;紫外分光光度法;质量标准

Primary Study on Quality Standard of Mongolian Crude Drug Huderinaidurijide

BAOLE Chaolu，NA Shengsang

（Academy of Mongolian Medicine，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110，China）

Abstract Objective：To establish quality standard of Mongolian crude drug Huderinaidurijide.Methods：According to relevant methods in Chinese Pharmacopoeia（2015 edition Ⅳ），impurity，moisture，ash and extract of Huderinaidurijide were tested.A silica gel G plate was used.Euphol was taken as a control.Petroleum ether（60～90 ℃）-ethyl acetate（10：1）was used as developing solvent and 10% sulfuric acid ethanol solution was used for color development.Huderinaidurijide was performed identification.UV spectrophotometry was applied.Taking euphol as a control，active ingredients-terpenoids of Huderinaidurijide were quantitatively analyzed at 545 nm wavelength.Results：The impurity of 3 batches of sample Huderinaidurijide was 0.69%～0.75%，with an average of 0.72% and a RSD of 4.26%.The moisture content ranged from 7.68%～7.74%，with an average of 7.72% and a RSD of 0.03%.The total ash was between 0.20% and 0.22%，with an average of 0.21% and a RSD of 2.86%.The acid-insoluble ash ranged from 0.21%～0.23%，with an average of 0.22% and a RSD of 4.82%.The extract ranged from 1.24 to 1.35，with an average of 1.31% and a RSD of 4.64%.In the chromatogram of the test product，spots of the same color were displayed at positions corresponding to the chromatogram of the control product.The total terpenoids showed a good linear relationship between 0.6720 and 5.3790 mg/L.The average recovery rate of this method was 97.48% and the RSD was 0.478%.The content of total terpenoids in the 3 batches of samples ranged from 25.67 to 35.94 mg/g，with an average of 31.03 mg/g.Conclusion：According to the results，it is formulated that impurity，moisture，total ash，and acid-insoluble ash in Mongolian crude drug Huderinaidurijide（calculated on dried products）can not exceed 1%，10.0%，0.4% and 0.4%，respectively.Water-soluble extract is not less than 1.0%.The content of total terpenoids is not less than 20 mg/g.This method can be used for quality control of Mongolian crude drug Huderinaidurijide.

Keywords Mongolian medicine; Huderinaidurijide; Euphol; Total terpenoids; TLC; Content determination; UV spectrophotometry; Quality standard

中图分类号：R284;R932文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.05.011

胡德日奈都日吉德为传统蒙医药较为常用的导泻药之一，是大戟科多生植物喜马拉雅大戟Euphorbia himalayensis Boiss.的干燥根[1]，味苦、辛，有毒。具有导泻、催吐、抗腐烂之功效，主要用于未尽“希拉”、死胎的下排和不消化、胸痞、铁屑“巴达干”“巴达干”病的催吐治疗[2]。胡德日奈都日吉德虽然入味多种蒙医传统复方制剂，但是其现代研究甚少，化学成分、药理药效、质量控制等几乎为零。本研究主要参考《中华人民共和国药典》（一部）2015年版[3]中记载的大戟科药材的质量标准，结合胡德日奈都日吉德的蒙医药用药特征，从药材的性状、显微、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、总萜含量等方面进行了研究，并初步建立了其质量标准，为胡德日奈都日吉德的质量控制提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

TU-1901型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）;锥形瓶，蒸发皿，硅胶G薄层板，称量瓶，容量瓶，无灰滤纸，坩埚等。

1.2 试剂

大戟二烯醇（中国食品药品检定研究院，生产批号：1118666-201411），生产批号为111866-201411，由中国食品药品检定研究院提供;甲醇，分析纯，生产批号为20140110，由天津市凤船化学试剂科技有限公司提供;石油醚，分析纯，生产批号为20150629，由天津市津东天正精细化学试剂厂提供;乙酸乙酯，分析纯，生产批号为20150812，由天津市凤船化学试剂科技有限公司提供;硫酸，分析纯，生产批号为20120618，由天津市翔宇化工工贸有限责任公司提供;无水乙醇，分析纯，生产批号为20150821，由天津市凤船化学试剂科技有限公司提供;冰醋酸，分析纯，生产批号为20160814，由天津市永晟精细化工有限公司提供。

1.3 分析样品

喜马拉雅大戟，药材在2015年、2016年期间分别购自于购自成都，呼和浩特，西藏拉萨等地。经内蒙古医科大学曲弼教授鉴定为大戟科植物喜马拉雅大戟Euphorbia himalayensis Boiss.的干燥根。

2 方法与结果

2.1 药材性状

本品多为圆柱形或圆锥形，长15～20 cm，直径约4 cm，外表面灰褐色至深褐色，粗糙，多在顶部肿胀，具圆形茎痕，逐渐渐细向下，有纵直沟槽、横孔和枝根痕。质地坚硬，不易折断，折部为淡黄色。尝起来又苦又涩。

2.2 鉴别

2.2.1 显微鉴别本品粉末为黄色和白色。淀粉粒较多，呈圆形。淀粉粒直径为2～20 μm。淀粉粒有点状或星状的脐点，有分层的图案，隐约可见，容易看到淀粉粒复粒和半复粒。可见直径为18～80 μm的网状导管核长条形的乳管细胞，细胞内含物呈黄色。木栓层可见长多角形细胞。实验结果如图1～4。

2.2.2 薄层鉴别取本品粗粉约1 g，加入25 mL甲醇溶液，超声处理30 min后滤过。取滤液置于蒸发皿中在水浴上蒸干后残渣加2 mL甲醇，溶解，作为供试品溶液。另取大戟二烯醇标准品适量，置于1 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，制成浓度为0.2 mg/1 mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色譜法《中华人民共和国药典》（四部）2015年版通则0502试验，吸取上述2种溶液各1 μL，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚（30～60 ℃）-乙酸乙酯（10∶2）作为展开剂进行展开后取出晾干，以10%硫酸乙醇溶液显色，105 ℃烘干箱中烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，实验结果如图5～7。

2.3 检查

本品为大戟科植物喜马拉雅大戟根，属于根类药材，采集过程中很容易带进石子、泥土等非药用部位。故正文参照《中华人民共和国药典》（2015版）[4]，对其所含的杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分进行了限量检查，从而控制药材的非用药部位，保证药材的纯度。

2.3.1 杂质参照《中华人民共和国药典》（四部）2015版通则2301进行杂质检查。取7批样品，每批400 g，拣出非要用部分，筛分泥沙，分别称重，计算其在样品中的重量，结果见表1。

结果表明：7批样品杂质检查在0.69%～2.55%之间，平均值为1.58%，故规定胡德日奈都日吉德杂质检查不得过3.0%。

2.3.2 水分参照《中华人民共和国药典》（四部）2015版通则0832中的第二方法，对7个批次的样品进行了水分含量测定，实验结果见表2。

从表2可知，胡德日奈都日吉德不同批次样品中的水分含量限度在5.42%～7.75%之间，其平均值为6.72%。根据实际操作和实验结果，规定胡德日奈都日吉德水分含量不得过10%。

2.3.3 灰分参照《中华人民共和国药典》（四部）2015版通则2302，对7个批次的样品中的总灰分和酸不溶性灰分进行了测定，实验结果见表3～4。

从表3～4可知，胡德日奈都日吉德不同批次样品中总灰分含量限度在2.66%～6.39%之间，其平均值为4.25%;酸不溶性灰分含量限度在1.11%～2.57%之间，平均值为1.72%。根据实际操作和实验数据，规定胡德日奈都日吉德总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过4.0%。

2.4 浸出物的测定

参照《中华人民共和国药典》（四部）2015版通则2201中的冷浸法，对7批样品的醇溶性浸出物进行了含量测定，实验结果见表5。

从表5可知，胡德日奈都日吉德不同批次样品中浸出物含量限制在1.24%～2.28%之间，其平均值为1.65%。根据实际操作和实验结果，规定胡德日奈都日吉德醇溶性浸出物不得少于1.0%。

2.5 总萜含量测定[5]

2.5.1 供试品溶液的制备精密称取胡德日奈都日吉德粉末（过四号筛）约0.2 g，精密称定，置于锥形瓶中，加入100 mL甲醇，称重，摇匀后超声处理声30 min，再称重，以甲醇补足失重，既得。

2.5.2 对照品溶液的制备取大戟二烯醇标准品适量，精密称定，加入甲醇制成浓度为40 mg/L的溶液，即得。

2.5.3 标准曲线的绘制精密量取对照品溶液0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL，分别置于10 mL容量瓶中，在恒温水浴中完全挥干溶剂后依次加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.5 m置冷水中2 min后精密加入5 mL冰醋酸，摇匀。分别以相应的试剂为空白，照分光光度法[《中华人民共和国药典》（四部）2015年版通则0401]于545 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标（Y），对照品的浓度（mg/L）为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程：Y=0.012 3X+0.069 29（R2=0.999 4），表明对照品溶液在10.27～82.16 mg/L范围内与吸光度值之间呈良好线性关系。

2.5.4 精密度试验精密吸取0.40 mL对照品溶液，按照“2.5.3”项下显色方法显色，测定吸光度，连续测定6次，实验结果见表6。从表6可知吸光度平均值为0.422，RSD为0.24%，表明仪器精密度良好。

2.5.5 稳定性试验精密吸取0.40 mL供试品溶液，按照“2.5.3”项下显色方法显色，每隔20 mim测定吸光度，测定2 h，实验结果见表7。从表7可知吸光度平均值为0.682，RSD为0.50%，表明供试品溶液在2 h内稳定，稳定性良好。

2.5.6 重复性实验精密称取同一批供试品粉末6份，按“2.5.3”项下的提取方法和显色方法提取和显色，测定吸光，实验结果见表8。从表8可知吸光度平均值为0.685，RSD为1.71%，表明本方法重现性良好。

2.5.7 加样回收率实验精密称取同一批供试品粉末6份，0.1 g/份，分别精密加入对照品溶液，按“2.5.3”项下方法提取、显色，测定吸光度，实验结果见表9。从表9可知平均回收率为98.8%，RSD为0.36%，表明本方法准确可靠。

2.5.8 样品测定精密吸取样品溶液0.40 mL，按“2.6.3”项下方法显色，测定吸光度，结果见表10，总萜含量在21.35～28.59 mg/g之间，均含量为25.69 mg/g，故规定胡德日奈都日吉德总萜含量不得少于20 mg/g。

3 讨论

泻下疗法是蒙医各种疗法中颇具特色的疗法[6]，是利用药剂刺激消化道，通利大便，荡涤胃肠，排除积滞，以促进消化功能的一种疗法，也是蒙医祛除“希拉”病残留的最為有效的方法[7-8]。具有临床疗效确切，不良反应少的特点[9-11]。胡德日奈都日吉德是蒙医临床常用的导泻药，由于其临床疗效较为显著，入味多种传统复方制剂，但是其现代研究几乎为零，化学成分、药理药效、质量标准等从未研究过[12]。本研究主要参考《中华人民共和国药典》（一部）2015年版中记载的大戟科药材的质量标准及大戟科药材的相关质量标准研究报道[13]，结合胡德日奈都日吉德的蒙医临床用药特征[14]，从药材的性状、显微、检查项和含量测定方面进行了研究。实验过程中根据薄层鉴别的结果，以大戟二烯醇为标志物进行含测，结果没有找到与大戟二烯醇相应的峰值，故选择了总萜含量。在实验过程中：

1）在显色剂选用方面选择了加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.5 mL和加入高氯酸溶液0.6 mL的剂量，从而保证了吸光度的最大值。

2）在加热温度方面选择了100 ℃水浴加热，使其吸光度值最大。

3）在加热时间方面选择了30 min，获得了一个最大吸收峰，从而避开了吸光度最大时出现相邻2个峰现象。

本研究通过以上试验，初步为蒙药材胡德日奈都日吉德的质量控制范围，建立了其质量标准。为保证胡德日奈都日吉德及其复方制剂的临床疗效的均一性和稳定性提供了参考依据。

参考文献

[1]罗布桑.蒙药学[M].呼和浩特：内蒙古人民出版社，2006：341.

[2]蒙药学家罗布桑学术成果编辑部.蒙药学家罗布桑学术成果[M].赤峰：内蒙古科学技术出版社，2011：2001-2008.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：225.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：103，202，101，102，38.

[5]包勒朝鲁，那生桑.蒙药胡德日奈都日吉德炮制工艺初步研究[J].中华中医药杂志，2018，33（4）：1608-1613.

[6]蒙古学百科全书编辑委员会.蒙古学百科全学·医学卷[M].内蒙古人民出版社，2002：721.

[7]白黎明，乌日汗.简述蒙医泻下疗法[J].世界最新医学信息文摘，2015，15（24）：90.