宁晓燕， 陈晓武， 柳勤译， 蔡少薇， 许 鸣

广东省第二人民医院消化科，广东 广州 510317

传统的化疗和放疗靶向快速增殖的肿瘤细胞，却放过了处于相对静止状态的肿瘤干细胞，导致肿瘤的复发和转移。近年来发现一些非传统化疗药物具有靶向杀伤肿瘤干细胞的作用，其中包括二甲双胍。二甲双胍是治疗2型糖尿病的常用药物，应用于临床已50多年。研究发现，二甲双胍可以降低癌症的发病率、复发率和死亡率，提示二甲双胍具有预防和治疗恶性肿瘤的作用[1]，此外，二甲双胍还可抑制肿瘤干细胞自我更新[2-3]。在我们前期研究中，采用细胞球培养法获取胰腺癌干细胞，并鉴定其具有肿瘤干细胞特性，这些胰腺癌干细胞能够抵抗吉西他滨，但对二甲双胍比普通胰腺癌细胞更为敏感[4]。为了探明二甲双胍对胰腺癌干细胞自我更新的影响及其分子机制，本研究在体外观察二甲双胍对胰腺癌干细胞自我更新的抑制作用，检测二甲双胍对胰腺癌干细胞Notch信号通路相关分子的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株：Panc1胰腺癌细胞株，购自上海中科院细胞研究所。

1.1.2 材料：DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)培养基、DMEM/F12培养基、胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)、B27、青霉素、链霉素均购自美国Invitrogen公司。普通胰岛素购自诺和诺德中国制药有限公司。二甲双胍购自美国Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养：人胰腺癌细胞株Panc1培养于质量浓度为100 g/L FBS的DMEM培养基(含质量浓度为10 g/L青、链霉素)，37 ℃、体积分数为5% CO2及饱和湿度条件下。

1.2.2 细胞球……