白藜芦醇调控Hedgehog信号通路抑制肝星状细胞活化的研究
2020-03-21周薏阙任烨李勇朱樑
周薏, 阙任烨, 李勇, 朱樑
(1.海军军医大学附属长征医院消化内科,上海 200003;2.上海中医药大学附属上海市中西医结合医院脾胃病科,上海 200082)
肝纤维化是肝硬化发病的重要环节,迄今没有满意的治疗方法。目前国内外绝大多数学者认为,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)激活是肝纤维化形成的关键,抑制HSC的激活对肝纤维化的防治具有重要价值[1]。有研究发现Hedgehog信号通路与HSC的活化密切相关,有效干预Hedgehog信号通路可抑制肝纤维化进展[2]。白藜芦醇是存在于中药藜芦、虎杖中的一种多酚类化合物,具有广泛的药理作用,且无毒副作用及致癌性报道[3],抗肝纤维化是白藜芦醇的重要应用领域之一[4-6]。目前,关于白藜芦醇抗肝纤维化的作用机制尚不完全明确,而又有多项研究[7-9]报道白藜芦醇可调控Hedgehog信号通路发挥作用,故本研究旨在观察白藜芦醇抑制HSC-T6细胞活化的机制是否与调控Hedgehog信号通路有关,现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 细胞 大鼠肝星状细胞株HSC-T6由上海第二军医大学长征医院消化科惠赠,其表型为活化的HSC。
1.2 药物、试剂与仪器 白藜芦醇购于中国药品生物制品检定所,纯度>99%,批号:111535-201703;环耙明(cyclopamine)购自美国Cayman公司,批号:11321。α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)(兔抗大鼠IgG多克隆抗体)购自美国Santa Cruz公司,批号:k1814;电化学发光(ECL)试剂盒购自美国Millipore公司,批号:1115702;DMEM高糖培养基购自美国Thermo Scientific公司,批号:NZH1209;胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)购自奥地利PAA公司,批号:A10106-0455;牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)购自美国Amresco公司,批号:201705;蛋白质分子量预染Marker购自美国Pierce公司,批号:27681;山羊抗兔HRP标记二抗购自美国Cell Signaling公司产品 , 批 号 : 8176;……
