不同提取方法对三七粉中人参皂苷Re含量测定结果的影响

2020-03-20屠颖晶

福建轻纺 2020年3期

屠颖晶

（福建省产品质量检验研究院，福建福州 350002）

三七又名田七、金不换、人参三七[1]，味甘微苦，性温。分布于江西、湖北、广东、广西等地，多为人工栽培。三七是产于我国特有的名贵中药材，也是最早的药食同源植物中的一种[2]。三七同时也是云南白药的主药，外用具有散瘀活血、消肿定痛之功效[3-4]，内服可以促进造血、调节血脂和血压、抗血栓、抗心肌缺血、调节免疫功能等功效[5-6]。三七的主要化学成分为黄酮、皂苷、氨基酸，其中三七皂苷具有较高的药用活性，用于心脑血管疾病类的药品、保健品的制备等。

本文采用5种不同的分离提纯方法，对三七粉中人参皂苷Re含量进行测定，研究不同的分离提纯方法下三七粉人参皂苷Re含量的差异，确定最佳提取方法，为三七粉的进一步深度开发提供更好的参考数据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

材料：三七粉，购于药店。

试剂：无水乙醇(AR)、正丁醇(AR)、乙醚(AR)、甲醇(AR)、香草醛(AR)，购于国药集团化学试剂有限公司；硫酸(AR)，购于西陇科学股份有限公司。

耗材：中性氧化铝/XAD-2 SPE小柱（1 g/4g，10 mL），购于上海安谱实验科技股份有限公司。

1.2 仪器与设备

DK-S26型水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；

BSA-224S型电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）；

UV-2700型紫外可见光光度计（日本岛津公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 三七粉中人参皂苷Re的提取分离

方法1：水溶液超声提取-大孔树脂柱分离纯化法[7]

精密称取样品约0.1 g，加入20 mL 85%乙醇，超声30 min，过滤，提取液蒸干，加水溶解，过中性氧化铝/XAD-2 SPE小柱（即大孔吸附树脂填料的型号为XAD-2），用25 mL水以0.15 mL/min流速洗柱，弃洗脱液，用25 mL 85%乙醇洗脱，收集洗脱液于50 mL鸡心瓶中，在60 ℃下减压蒸干，残渣用甲醇溶解，并定容至25mL，此溶液为样液1。

方法2：乙醚脱脂-索氏抽提法[8]

精密称取样品约0.1 g，用中性滤纸包好，于索氏抽提器中，加入适量乙醚，水浴微沸回流抽提1 h，弃乙醚，并挥尽滤纸和残渣中的乙醚。往滤纸和包裹的残渣加入适量甲醇浸泡过夜，次日微沸回流进行索氏抽提，抽提回流6次后，收集甲醇抽提液于蒸发皿中，水浴蒸干。用30 mL蒸馏水溶解残渣并置于分液漏斗中，加入30 mL正丁醇（用水饱和过的）进行萃取，共萃取4次。收集上层萃取液，水浴蒸干，用适量甲醇溶解残渣，并定容至25 mL，此溶液为样液2。

方法3：甲醇索氏抽提法[9]

精密称取样品约0.1 g，用中性滤纸包好，于索氏抽提器中，加入适量甲醇浸泡过夜，次日微沸回流进行索氏抽提，抽提回流6次后，收集甲醇抽提液于蒸发皿中，水浴蒸干。用30 mL蒸馏水溶解残渣并置于分液漏斗中，每次加入30 mL正丁醇（用水饱和过的）进行萃取，共萃取4次。收集上层萃取液，水浴蒸干，用适量甲醇溶解残渣，并定容至25 mL，此溶液为样液3。

方法4：乙醚脱脂-甲醇超声提取法

精密称取样品约0.1 g，用中性滤纸包好，于索氏抽提器中，加入适量乙醚，水浴微沸回流抽提1 h，弃乙醚，并挥尽滤纸和残渣中的乙醚。将滤纸和残渣置于具塞锥形瓶中，加入甲醇20 mL，超声提取30 min后过滤，滤液用适量甲醇定容至25 mL，此溶液为样液4。

方法5：水浸提法[9]

精密称取样品约0.1 g，加入20 mL蒸馏水，于50 ℃水浴恒温加热提取1 h，过滤，蒸干滤液，残渣用甲醇少量多次溶解，定容至25 mL，此溶液为样液5。

1.3.2 标准溶液的配制

精密称取人参皂苷Re对照品20 mg，用甲醇溶解并定容至10 mL，此溶液为人参皂苷Re对照品储备液，即每1 mL含人参皂苷Re2.0 mg。

1.3.3 标准曲线的建立

吸取人参皂苷Re对照品储备液10、20、30、40、60、80、100 μL（相当于人参皂苷Re20、40、60、80、120、160、200 μg）于25 mL比色管中，60 ℃以下加热挥干溶剂甲醇。依次加入8%香草醛乙醇溶液0.5 mL、72%硫酸溶液5 mL，振摇混匀后于60 ℃恒温水浴加热10 min，立即用冰水浴冷却10 min，摇匀，以试剂作空白，于544 nm波长处使用1 cm的比色皿，分别测定吸光度值。