王晓通 吴锟 李雷 麦威 钟晓刚

1广西壮族自治区人民医院胃肠外周血管外科（南宁530021），2广西壮族自治区民族医院胃肠肝胆外科（南宁 530001）

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和病死率在我国恶性肿瘤中分别居第二、三位［1］。化疗在中晚期胃癌和复发转移型胃癌的治疗中发挥重要的作用。然而有研究表明，增加化疗并不能延长胃癌患者的生存期［2］。其中一个重要的原因是肿瘤耐药性的产生。因此，寻找调节和对抗胃癌耐药性的方法、揭示胃癌耐药性的分子机制具有重要意义。

SIVA1基因作为促凋亡分子，能通过与CD27结合诱导T淋巴细胞凋亡［3］。研究表明SIVA1能够通过与多种受体结合，增加乳腺癌细胞和宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性，从而促进肿瘤细胞凋亡［4-5］，但目前关于SIVA1在胃癌耐药中的作用尚未有报道。为了探讨SIVA1在胃癌耐药发生发展中的作用，本研究通过构建靶向人SIVA1基因的短发夹RNA（shRNA）重组慢病毒载体并转染胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP，探讨沉默SIVA1的表达对细胞耐药性以及细胞增殖的影响，并通过Western blot检测细胞Bcl-2、Bcl-xL的蛋白表达，探讨SIVA1影响胃癌耐药的可能机制，为后续实验研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料 人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP由本实验室自行诱导构建并保存。目的质粒载体GV493、辅助载体 pHelper1.0、pHelper2.0、限制性内切酶（AgeI、EcoRI）购自上海吉凯基因科技有限公司。RNAi靶点设计、引物设计和合成、阳性克隆转化子测序、对GV493慢病毒载体的改造和病毒包装由上海吉凯基因科技有限公司完成。RPMI-1640培养基和胎牛血清购自Gibco公司；……