刘素蕊 杨晓亚 高裕华 王更银

近年来，富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP）的应用已不再局限于生理性止血、凝血及参与维持毛细血管的完整性等方面，它在运动医学及整形烧伤领域中所发挥的控制炎症，促进血管、组织愈合等作用也引起了广泛关注[1]。其发挥作用的关键在于PRP中的高浓度血小板被激活后释放活性颗粒，其中的生长因子可以促进创伤部位的修复。20世纪70年代，PRP首次分离并应用于临床手术患者[2]。PRP可由全血手工离心或血细胞分离机制备，其血小板浓度通常是全血中生理浓度的4～8倍[3，4]。PRP中加入激活剂，促使血小板激活形成凝胶（PRP gel）并释放胞内的多种生物活性分子，释放液称为PRP releasate，能够促进间充质干细胞的增殖、迁移等行为[5-8]，在细胞组织工程领域意义重大。但目前，制备PRP releasate的实验流程并不统一，使得对研究结果的解释缺乏比较意义。例如针对PRP的激活剂种类较多，包括凝血酶和/或葡萄糖酸钙及氯化钙等[9-11]。此外，激活所用的凝血酶多来源于牛或猪，还需考虑其在人体内的致敏性。有研究表明，在没有外源性凝血酶存在的情况下，PRP中含有的内源性凝血酶原在Ca存在的情况下，也可以活化形成凝血酶，最终形成PRP releasate[12]。所以，本实验在没有应用凝血酶的情况下以FBS培养细胞作为对照组，比较葡萄糖酸钙注射液和CaCl2注射液两种激活剂制备的PRP releasate对ucMSCs迁移和黏附等的影响，以期对PRP releasate和ucMSCs的联合应用提供理论依据。

材料与方法

1 材料 留取输血传染病检测为阴性的健康新生儿脐带，分离培养ucMSCs。……