利用cDNA-AFLP技术分析炭疽菌危害诱导茶树的差异表达基因
2020-02-25魏日凤赖建东彭成彬张承康连玲丽刘伟
魏日凤,赖建东,4,彭成彬,张承康,连玲丽,刘伟,*
利用cDNA-AFLP技术分析炭疽菌危害诱导茶树的差异表达基因
魏日凤1,赖建东1,4,彭成彬1,张承康2,连玲丽3*,刘伟1,2*
1. 福建农林大学园艺学院,福建 福州 350002;2. 宁德师范学院生命科学学院,福建 宁德 352100;3. 福建农林大学生命科学学院,福建 福州 350002;4. 湖北科技学院,湖北 咸宁 437100
应用cDNA-AFLP技术筛选炭疽菌(sp.1)危害诱导茶树毛蟹品种(cv.)的差异表达基因,为探究茶树抗炭疽菌的分子机制奠定基础。利用256对选择性扩增引物组合分析病菌接种后0 h和48 h的叶片cDNA,经筛选、测序和BLAST比对获得136条差异表达片段(TDFs)。同源基因功能分析结果表明,128条TDFs与Nr数据库已有基因同源,其功能以胁迫响应、生物调控与信号转导为主;其中51条TDFs与TPIA数据库中冷害、干旱、盐碱条件下的差异表达基因高度同源。进一步对27条TDFs进行qRT-PCR验证,结果显示,有24条TDFs的表达情况与cDNA-AFLP的结果一致,WRKY转录因子、乙烯响应转录因子、过氧化物酶和超氧化物歧化酶等抗逆相关基因的表达显著上调。本试验通过筛选获得差异表达的抗逆相关基因,为后续的基因功能研究奠定基础。
茶树;炭疽菌;cDNA-AFLP;差异表达基因
由刺盘孢菌引起的茶炭疽病是危害茶叶生产的一种重要病害,对南方茶区尤其是高湿低洼茶园造成了严重的经济损失[1-2]。梅雨和秋雨时节该病害的大面积蔓延,除了导致茶叶的大量减产,更影响茶叶品质。选育和种植抗病品种是防治这类病害最经济、安全、有效的措施。但现有许多茶树栽培品种对炭疽病菌高度感病[3],抗病品种资源的缺乏加大了传统育种的难度。……
