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结核菌Xpertrpob基因利福平耐药快速检测的临床价值

2020-02-24谭雪松

健康大视野 2020年3期
关键词:结核菌利福平

谭雪松

【摘 要】 目的:研究结核菌Xpert(rpob)基因检测在利福平耐药性的快速检测过程中的临床价值。方法: 选取2018年5月~2019年7月在长春市传染病医院诊断为肺结核病患者400例作为本次研究对象 采用Xpert MTB/RIF (简称Xpert)、抗酸染色法 320液体培养法三种方法对结核菌进行检测,并对比其检测灵敏度与检测时间。结果:Xpert检出率明显优于抗酸染色法(P<0.05)。Xpert技术与液体培养法之间无统计学差异。(P >0.05)。Xpert检测时间最短。用液体培养结合胶体金法菌型鉴定结果为检验结核杆菌的金标准,Xpert检测结核分枝杆菌灵敏度为94.20%,特异性为96.39%,阳性预测值为94.53%。以液体药敏作为金标准,Xpert检测与液体药敏检测法有较好的一致性。结论:Xpert作为一种新的检测方法,具有检测时间短、操作准确性高的特点,对于肺结核的诊断具有重要意义。

【关键词】 结核菌;Xpert;利福平;药敏检测

【中图分类号】R520.4   【文献标志码】A   【文章编号】1005-0019(2020)03-089-01

结核病是由结核杆菌(Tubercle Bacillus,TB)感染引起的一种具有传染的慢性疾病,以肺结核最为常见,是导致人类死亡的主要疾病之一。我国结核病防治规划的目标是在2030年使发病率降低80%,而病死率降低90%。为实现此目标,结核病的早期诊断及其耐药性检测具有非常重要的应用价值。然而目前我国结核病检测实验室设施还不发达,主要确诊方法仍停留在涂片和体外培养等传统方法,检出率低,且培养周期长,很容易耽误患者的病情。Xpert MTB/RIF系统是由WHO推荐的近年来在结核病的快速诊断和利福平耐药性检测应用较为广泛,该技术在我国结核病防治机构被初步使用,诊断技术还初级阶段[1]。本研究采用Xpert系统对肺结核及疑似患者痰样本进行结核杆菌及其对利福平耐药性的检测,进而评价 Xpert系统在耐多药结核病快速诊断中的价值。

1 资料和方法

1.1  一般资料

选取2018年5月~2019年7月长春市传染病医院收纳的400例肺结核病患者作为本次研究对象。所有患者均符合《肺结核诊断标准》[2]其中男性236例,女性164例,平均年龄(44.4±2.6)岁,所有入组患者均签署知情同意。

1.2 仪器与试剂

快速培养药敏系统(美国BD公司);Xpert MTB/RIF系统(美国Cepheid公司),萋-尼氏抗酸染色试剂盒(上海江莱生物科技有限公司)。

1.3  抗酸染色 液体培养和药敏试验方法

抗酸染色按照文献[1]进行操作。取1~2ml样本进行液体培养,对阳性菌株进行涂片确认,鉴定为结核分枝杆菌的进行药物耐药检测。

1.4  Xpert检测流程

取痰样本放置处理管中,加入2倍体积的处理液振荡混匀并放置10min。打开试剂盒,取2ml液化样本加入试剂盒中,然后将试剂盒放到仪器模块中,仪器开始进行检测

1.5  统计学方法

应用SPSS 20.0统计软件分析,P<0.05为差异有统意义。以液体培养和药敏为检测金标准,统计Xpert的灵敏度和特异性。

2 结果

2.1  三种方法检出率及报告时间 400例肺结核痰样本同时采用Xpert、抗酸染色法、320液体培养法进行检测。Xpert检出率36.75% (147/400),抗酸染色检出率17.75% (71/400),320液体培养检出率35.75% (143/400)。对比Xpert与抗酸染色法,Xpert检出率明显优于抗酸染色法(P<0.05)。Xpert技术与液体培养法之间无统计学差异。(P >0.05)  抗酸染色的检出时间为3h,Xpert检测时间2h,MGIT320平均检出时间为10.8 (5.0~19.0)d。

2.2  Xpert检测结核杆菌的诊断效能 400例患者中液体培养阳性143例,培养阴244性例,有13例污染,Xpert检测阳性147例,阴性250例,有3例结果錯误。液体培养阳性的菌株可通过胶体金法确认结核分枝杆菌共121例,非结核分枝杆菌7例。用液体培养结合胶体金法菌型鉴定结果为检验结核杆菌的金标准,通过Xpert检测结核分枝杆菌灵敏度为94.20% (130/138),特异性为96.39% (267/ 277),阳性预测值为94.53%(128/121),阴性预测值为97.26%(249/256)。Xpert检测结核杆菌结果,见表1。

2.3 Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性

对130例结核菌株进行液体药敏试验,对利福平耐药有7例,敏感的有123例。通过Xpert检测出利福平耐药10例,敏感的120例。两者检测利福平同时耐药9例,敏感117例,两者检测利福平结果不同的有3例。以液体药敏作为金标准,Xpert检测利福平耐药性的灵敏度90%(9/10),特异性98.37%(121/123),阳性预测值90%(9/10) 阴性预测值97.5% (117/120)。两种方法一致性较好,Kappa值为0.90≥0.75。两者检测利福平结果有所不同。不一致的菌株经ropB基因测序后,均未检测到基因突变,结果为利福平敏感菌株。

3 讨论

结核分支杆菌可引起全身疾病,最常见的为肺结核。而且结核杆菌生长较慢,给检验带来了很大困难。Xpert系统可同时检测结核分枝杆菌和利福平是否耐药。本研究显示Xpert、液体培养、抗酸染 色对结核杆菌的检出率依次为36.75%、17.75%、35.75%。Xpert在检测结核方面与以液体培养联合胶体金菌种鉴定结果灵敏度相似,特异度略高。以液体药敏作为金标准,Xpert检测结核杆菌对利福平的耐药性具有较高灵敏度。

综上所述,Xpert作为一种新的检测方法,具有检测时间短、操作准确性高的特点,对于肺结核的诊断具有重要意义。

参考文献

[1] 中华医学会.临床诊疗指南:结核病分册IN].北 京:人民卫生出版社,2015:2-5.

[2] 陆峰,马俊锋,王小平,符剑.Xpert MTB/RIF快速检测结核分枝杆菌技术的应用[J].江苏预防医学,2019,30(03):335-336.

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