刘小龙 赖隆永 马绍伟 陈盛勇 叶盛聪 徐 磊 杨 慧 余勋信

(1.派生特(福州)生物科技有限公司 福州 350500；2.福建农业职业技术学院 福州 350303)

抗菌肽又称宿主防御肽，可以从动物、植物、微生物中获得，有研究者利用乙酸浸提法从猪小肠中成功地提取到抗菌肽类物质[1-3]。抗菌肽不仅可以由嗜中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞产生，而且在黏膜和皮肤的上皮细胞、枝状细胞和角蛋白细胞中也可以产生。可以为组成型表达，也可以由前炎症因子和体外病原诱导产生[4]。

迟发型变态反应（Delayed type hypersensitivity，DTh），属Ⅳ型细胞介导的迟发型变态反应，根据其机理，利用一些小分子半抗原类物质使动物体致敏，致敏后让动物体再次接触这类抗原，一段时间后引发动物体局部的变态反应。二硝基氟苯（2,4-dinitro-1-fluorobenzene，DNFB）是一种半抗原，将其涂抹腹壁皮肤致敏后，4～7 d后再将其涂抹于耳部，使局部产生迟发型变态反应。

本研究通过小鼠迟发型变态反应试验，反映猪小肠抗菌肽的药理活性，以期了解猪小肠抗菌肽对细胞免疫水平的调节作用。

1 材料与方法

1.1 试验动物 健康昆明小鼠，体重（20±2）g，雌、雄各半，由福建医科大学实验动物中心提供。

1.2 试剂仪器 二硝基氟苯（DNFB）、麻油、生理盐水、丙酮（均为国药集团化学试剂有限公司）；猪小肠抗菌肽（多肽含量为0.7 mg/mL）由派生特（福州）生物科技有限公司提供；JA2603B型电子天平（上海精科天美科学仪器有限公司）。

1.3 溶液配制 1%DNFB溶液配制：称定50 mg DNFB，置于洁净的干燥小瓶中，将预先配好的5 mL丙酮麻油溶液（丙酮∶麻油＝1∶1）倒入小瓶，盖好瓶塞并用胶布密封，混匀后，用注射器通过瓶盖取用。……