荆 扬，李卉佳，许世萱，马景华

（西北农林科技大学动物医学院 712100）

近年来，食源性疾病的爆发严重威胁着全球范围内的公共卫生，造成了巨大的经济损失。 来自世界卫生组织的报道说，每年有近十分之一的人因此患病， 且会丧失3300 万个健康生命。分子生物学PCR 方法检测沙门氏菌具有快速、简便、灵敏度高等优点。

1 常规PCR 技术

PCR 作为一种分子生物学检测方法， 其原理是以DNA 分子为模板， 加入设计好的特异性引物、dNTP 及DNA 聚合酶，在体外发生酶促合成反应，通过温度和时间的控制而实现DNA 片段的扩增。 侯宛宛[1]等人研制出一种沙门氏菌PCR 的检测试剂盒。其检测限为37.5 fg/PCR，将试剂盒经反复冻融60 次后，检测限还可以达到375 fg/PCR。 通过对食品样品进行检测， 含4～5 cfu/10g 鼠伤寒沙门氏菌的样品，在12h 内可被检出。

2 多重PCR 技术

常规PCR 技术用于一对引物去扩增出一个核酸片段，主要适用于单一致病菌的检测， 而多重PCR 主要用于多种致病菌的检测或鉴定，与常规PCR 技术相比，多重PCR 技术具有快速、准确和节约时间等优点。 Prem Shankar[2]等人开发了一种用来检测市政供水中溶血性大肠杆菌、 兰氏乳杆菌和沙门氏菌污染的PCR 法，其设计了针对三种细菌的特异性引物。 在158 个水样本中， 通过mPCR 发现56.32%呈阳性， 而常规方法仅检测到6.96%。

3 实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR 是在反应体系中加入了荧光物质，通过测定荧光信号的变化来检测PCR 扩增反应中循环产物量的变化， 并通过Ct 值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。其相比于常规PCR 方法， 其有特异性更强、 自动化程度高等优点。 Elisa Carloni[3]等人将多重磁捕获杂交和实时荧光定量PCR技术相结合， 可用于确定食物中三种重要的食源性致病物种的存在，其中包括沙门氏菌。 扩增实验表明，对沙门菌的敏感性相当于10 GU/PCR。

4 复合PCR 结合变性高效液相色谱分析技术

Yuejiao Liu[4]等人开发了一种三基因多重高分辨率熔体曲线实时PCR 检测技术，设计了invA、stn 和fimA 三个特异性基因的引物，在81 株沙门菌上验证其效果。 该方法有效地减少因具有三个靶基因之一而产生的假阴性或假阳性的结果。

5 小结与展望

沙门氏菌作为常见的食源性致病菌， 其对人体和动物造成的危害也受到更多的关注。 随着关注度的增高，沙门氏菌的检测方法得到不断的发展和提高。 各类检测方法和技术多种多样，各有其优缺点和适用情况， 因此根据具体情况选用恰当的方法以达到最大的效益。

现阶段在沙门氏菌检测方法上已取得可喜的成就， 在实际应用中成效明显。 随着科学技术的快速发展，PCR 检测技术必定朝着更加快速、敏捷、准确且经济的方法发展和提升。