李可月 ，李 都，王 镁

(1.辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 110032；2.辽宁中医药大学附属医院内分泌科，辽宁 沈阳 110032)

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是糖尿病常见的并发症之一[1]，作为缺血性心脑血管疾病的病理基础，AS的防治对糖尿病患者临床二级预防有着重要的意义。其发病机制之一血管内皮氧化应激学说被学者广泛认同[2]。核转录因子E2相关因子2(neclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element，ARE)信号通路是近年来发现调控氧化应激的重要信号通路，通路中Nrf2及血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)等均具有明显的抗氧化应激作用[3]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的过度表达，使血管内皮细胞病理增生，对血管内皮产生的损伤，可使AS进一步发展[4]。已有研究发现木丹颗粒对糖尿病患者AS有干预作用[5]。本研究在此基础上观察木丹颗粒对高糖环境下人血管内皮细胞Nrf2/ARE信号通路及血管内皮生长因子VEGF表达的影响，并进一步探讨木丹颗粒对糖尿病AS的影响是否与Nrf2/ARE信号通路抗氧化应激、减少VEGF含量有关。

1 材料

1.1 动物 SPF级6周龄雄性Wistar大鼠30只，体质量(230±20)g，生产许可证号：SCXK(辽)2015-0001，于辽宁长生生物技术有限公司采购。此实验已通过辽宁中医药大学实验动物伦理委员会批准(编号：20161202)，操作步骤均符合中国伦理委员会动物研究相关指导原则。

1.2 细胞 人血管内皮细胞株(货号 4200)：广州吉妮欧生物科技有限公司，美国Sciencell研究实验室。

1.3 试剂 RPMI 1640培养基、PBS缓冲液(批号 10040586R、AB10115027)：Hyclone公司；Trizol试剂(批号 14105)：Invitrogen公司；胎牛血清(批号 1108862)：Gibco公司；兔源β-actin一抗(批号 4970)：Cell Signaling公司；Prime Script®RT Reagent Kit with gDNA Eraser试剂盒、SYBR®Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)、ROX Plus试剂盒(批号 RR047A，RR82LR)：Takara公司；人VEGF酶联免疫检测试剂盒(批号 AE98006Hu)：AMEKO公司；SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒、BCA蛋白浓度试剂盒(批号 P0019、P0018A、P0012AC、P0012S)：碧云天生物技术有限公司；……