刘永波,陈奕至,李艳萍,冯 宇，郭怡辉

(首都医科大学附属北京世纪坛医院乳腺外科，北京 100038)

乳腺癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，给女性的生命健康带来严重危害，其发病率和病死率呈逐年上升趋势[1]。提高乳腺癌治愈率和生存率的关键是早发现、早诊断和早治疗。人表皮生长因子2(HER-2)、癌抗原153(CA153)及人附睾蛋白4(HE4)均是临床乳腺癌诊断和病情监测的常用肿瘤标志物，但单项标志物检测具有局限性。近年来，不同标志物的联合检测不断受到研究者的关注[2-3]。为探讨血清HER-2、CA153及HE4联合检测对乳腺癌的诊断价值，本文选取60例乳腺癌患者、80例乳腺良性疾病患者及60例健康妇女进行对照研究。现将其研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年6月至2017年4月，选取本院收治的60例乳腺癌患者作为乳腺癌组，均经过病理检查确诊，临床分期为Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ期18例，Ⅳ期14例；年龄28～60岁，平均(43.5±3.8)岁。乳腺良性疾病组80例，年龄29～59岁，平均(44.1±4.2)岁，包括乳腺良性肿瘤36例，乳腺增生25例，乳腺炎19例。选取同期进行体检的健康妇女60例作为对照组，各项指标均正常，且无乳腺疾病史，年龄26～58岁，平均(44.5±4.7)岁。3组研究对象基础资料差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2研究方法 所有研究对象于清晨抽取空腹静脉血4 mL，待其凝固后分离获得血清，HER-2采用酶联免疫法检测，试剂盒来自陕西中瑞国森生物试剂有限公司。CA153和HE4采用罗氏公司Cobase601电化学发光分析仪及原装配套试剂盒进行检测。阳性结果标准：HER-2水平>15 mg/mL，CA153水平>25 U/mL，HE4水平>140 pmol/L。免疫组织化学：采用免疫组织化学SP两步法，用二氨基联苯胺(DAB)显色。CA153以细胞质着色为阳性，HER-2以细胞膜着色为阳性，HE4以细胞核及细胞质中着色为阳性，每张切片随机选取5个高倍视野进行观察，阳性细胞率：阳性细胞数<5%为(-)，5%～<25%为(+)，25%～50%为(++)，>50%为(+++)。

2 结 果

2.13组血清HER-2、CA153及HE4水平比较 乳腺癌组血清HER-2、CA153及HE4水平显著高于乳腺良性疾病组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.23组HER-2、CA153及HE4表达情况比较 乳腺癌组HER-2、CA153及HE4表达阳性率显著高于乳腺良性疾病组和对照组(P<0.05)，且乳腺癌患者CA153表达阳性率显著高于HER-2和HE4(P<0.05)。结果见图1、表2。

表1 3组血清HER-2、CA153及HE4水平比较

注：与对照组比较，aP<0.05；与乳腺良性疾病组比较，bP<0.05。

2.3不同临床分期乳腺癌患者血清HER-2、CA153及HE4水平比较 乳腺癌患者Ⅳ期血清HER-2、CA153及HE4水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ期，Ⅲ期血清HER-2、CA153及HE4水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.4血清HER-2、CA153及HE4对乳腺癌的诊断学指标比较 血清HER-2、CA153、HE4联合检测的灵敏度(71.9%)及准确度(80.0%)均显著提高(P<0.05)，但特异度(89.3%)差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

注：A表示 CA153在乳腺癌高强度表达(+++)细胞质着色；B表示HE4在乳腺癌较强表达(++)细胞质着色；C表示HER-2在乳腺癌较强表达(++)细胞膜着色。

图1 ER-2、CA153及HE4在乳腺癌细胞膜的着色情况(EnVision染色，×400)

表2 3组HER-2、CA153及HE4表达情况比较[n(%)]

注：与对照组比较，aP<0.05；与乳腺良性疾病组比较，bP<0.05。

表3 不同临床分期乳腺癌患者血清HER-2、CA153及HE4水平比较

注：与Ⅲ期和Ⅳ期比较，aP<0.05；与Ⅳ期比较，bP<0.05。

表4 血清HER-2、CA153及HE4对乳腺癌的诊断学指标比较(%)

3 讨 论

HER-2是一种相对分子质量为185×103(P185)的具有络氨酸激酶活性的跨细胞膜糖蛋白，由HER-2/neu癌基因编码。HER-2结构可分为胞外区、跨膜区和胞内区3部分，不同的区域分别执行不同的生理功能[4]。胞外区可与相应配体结合，产生激活信号，胞内区则具有络氨酸激酶活性及ATP结合位点，通过某些途径可降低抑癌因子p53表达，抑制细胞M期的调控，促进细胞的有丝分裂，抑制凋亡，通过促进新生血管生成，导致肿瘤细胞侵袭性的增加。有研究表明，HER-2过表达与乳腺癌的发生、发展及转移有密切关系[5]。有研究显示，乳腺癌患者血清HER-2水平及阳性检出率均显著高于乳腺良性疾病组和健康对照组(P<0.05)，且血清HER-2水平随着乳腺癌患者临床分期的增加而增高(P<0.05)[6-7]。有国外文献报道，HER-2阳性表达患者肿瘤侵袭性高，预后不良，提示HER-2水平可以对乳腺癌预后进行有效预测[8]。美国临床肿瘤学会及美国病理学家学会指南也建议将HER-2作为乳腺浸润性导管癌的常规检测指标。

CA153是临床用来诊断乳腺癌的常用肿瘤标志物，是乳腺上皮细胞表面糖蛋白的变异体。CA153参与细胞黏附，可减少细胞与细胞或基质的相互作用，抑制细胞毒性T细胞和淋巴因子对杀伤细胞的激活作用，促进乳腺癌的进展，参与启动乳腺癌侵袭和转移。在乳腺癌患者血清中，CA153呈过度表达，且其水平与乳腺癌淋巴结转移有密切关系，因此，可以将其作为乳腺癌疗效和预后监测的指标。王英等[9]研究结果显示，早期乳腺癌淋巴结转移组CA153水平显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)，经Logistic回归分析显示，CA153水平是影响早期乳腺癌淋巴结转移的独立危险因素。张红雨等[10]研究表明，乳腺癌组血清CA153水平显著高于乳腺良性疾病组和对照组(P<0.05)。乳腺癌患者Ⅲ～Ⅳ期血清CA153水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05)。

HE4基因最早是从人的附睾中克隆，HE4属于一种酸性小分子分泌型糖蛋白，为乳清酸性4-二硫化中心蛋白家族成员，与细胞外蛋白酶抑制剂具有较高的同源性，其在自然免疫中可能产生重要作用。后经过多年的研究发现，HE4在卵巢癌、乳腺癌、肺腺癌、胰腺癌及移行细胞癌中均有不同程度的高表达[11]。早在2011年，美国食品药品监督管理局就公开表示，HE4联合CA125可以对卵巢癌进行有效诊断[12]。党小军等[13]研究结果显示，HE4在乳腺癌患者血清中显著升高，将HE4与CA153联合检测，会提高乳腺癌的检出率，其灵敏度为52.00%，特异度为70.59%。

本研究结果中，乳腺癌组血清HER-2、CA153及HE4水平显著高于乳腺良性疾病组和对照组(P<0.05)，乳腺癌组HER-2、CA153及HE4表达阳性率显著高于乳腺良性疾病组和对照组(P<0.05)。说明HER-2、CA153及HE4在乳腺癌中高表达，可能参与了乳腺癌的发生、发展过程。另外，随着乳腺癌患者分期的提高，血清HER-2、CA153及HE4水平不断提高(P<0.05)，提示这3项指标可能与乳腺癌的分期有关，血清HER-2、CA153及HE4水平的升高可能提示肿瘤恶性程度较高，容易发生癌细胞转移。本文通过诊断学研究显示，血清HER-2、CA153、HE4联合检测的灵敏度(71.9%)及准确度(80.0%)差异有统计学意义(P<0.05)，但特异度(89.3%)差异无统计学意义(P>0.05)。3项指标联合检测显著提高了乳腺癌诊断的灵敏度，还保持较高的特异度，对乳腺癌具有较大的辅助诊断价值，可有效减少漏诊，值得进一步探究各指标参与乳腺癌的具体作用机制。

4 结 论

血清HER-2、CA153及HE4联合检测可提高对乳腺癌的检出率，且还可作为病情严重程度和治疗监测的辅助检查指标。