童妍　李欢欢　罗丹　赵焕瑛　罗伦才

【摘 要】 目的：探讨益肾补气强身茶对慢性疲劳综合征（CFS）小鼠内分泌功能的调节作用。方法：SPF级KM小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组：正常组、模型组、阳性组、益肾补气强身茶高、中、低剂量组。除正常组外，各组每天上、下午各强制游泳2h，水温（25±1）℃，水深20cm，各组每天灌胃给药，连续7d，测定各组的血清三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺素（TSH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、孕酮（PG）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、醛固酮（ALD）、脱氢异雄酮（DHEA）的含量。结果：与模型组相比，益肾补气强身茶小鼠血清中ACTH、ALD、 DEHA、CORT、FSH、LH、T4浓度降低，E2、T3浓度升高。结论：益肾补气强身茶能改善CFS小鼠的内分泌功能。

【关键词】 益肾补气强身茶;慢性疲劳综合征;神经内分泌

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2020）23-0015-03

Regulatory Effect of Yishenbuqiqiangshen Tea on Endocrine Function in Mice with Chronic Fatigue Syndrome

TONG Yan1 LI Huanhuan1 LUO Dan1 ZHAO Huanying1 LUO Luncai2*

1.College of Life Science and Engineering， Southwest Jiaotong University， Chengdu 610031， China;

2.The Second Peoples Hospital of Liangshan Yi Autonomous Prefecture， Xichang 615000， China

Abstract：Objective To investigate the regulatory effect of Yishenbuqiqiangshen tea on the endocrine function of chronic fatigue syndrome mice. Methods Sixty SPF KM mice， half male and half female， were randomly divided into six groups： normal group， model group， positive group， high， medium and low dose group. In addition to control group， each group was forced to swim for 2 hours in the morning and afternoon， the water temperature was （25±1）℃， and the water depth was 20cm， Each group was administrated by gavage every day for 7 consecutive days. The contents of T3， T4， TSH， E2， T， LH， FSH， PG， ACTH， CORT， ALD and DHEA were measured. Results Compared with the model group， compared with the model group， the concentrations of ACTH， ALD， DEHA， CORT， FSH， LH， T4 in the serum of yishenbuqiqiangjian tea mice decreased， while the concentrations of E2 and T3 increased. Conclusion Yishenbuqiqiangshen tea can improve the endocrine function of mice with chronic fatigue syndrome.

Keywords：Yishenbuqiqiangshen Tea; Chronic Fatigue Syndrome; Neuroendocrine

隨着社会发展，亚健康问题日益突出，而慢性疲劳综合征（Chronic Fatigue Syndrome，CFS）是亚健康状态的最主要的表现形式，CFS的特征是慢性持续性疲劳，患者由于极度疲劳使其工作生活和身体健康受到严重影响。CFS与高压力的生活状态有关，随着人们生活节奏的加快、生活压力的增加，CFS的发病率也越来越高，对生活质量产生了严重的影响[1]。

后世医家认为慢性疲劳综合征当属于虚劳、郁证等范畴。关于CFS的中医学病机，大多数学者认为以虚为主，虚实夹杂，与五脏有着紧密联系，其中脾肾两脏在疲劳发病中起着重要的作用，慢性疲劳综合征的根本病机是脾肾亏虚，故其根本治法是补益脾肾。益肾补气强身茶是凉山彝族自治州第二人民医院的院内制剂，集调理预防和治疗于一体，具有安养五脏、补益脾肾、润燥通便、降脂通脉功能。方中肉苁蓉补肾阳、益精血、润肠通便，黄精补气养阴、健脾、润肺、益肾，黄芪补气养血，用于脏腑功能减退，调节失衡所致的虚烦失眠、虚秘、食欲不振、倦怠无力、体质虚弱、反复感冒、高脂血症等常见病、多发病，效果显著。本实验以CFS小鼠为对象，探究益肾补气强身茶对CFS小鼠内分泌功能的调节作用，为益肾补气强身茶的临床应用和产品开发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂 益肾补气强身茶，凉山彝族自治州第二人民医院，川药制字Z20080266;生脉饮，云南白药集团股份有限公司，国药准字Z20044150。Mouse  ACTH ELISA KIT，货号：xl-Em0004;Mouse ALD ELISA KIT，货号：xlEm0007;Mouse CORT ELISA KIT，货号：xlEm0551;Mouse DHEA ELISA KIT，货号：xlEm1041;Mouse E2 ELISA KIT，货号：xlEm0478;Mouse FSH ELISA KIT，货号：xlEm0427;Mouse LH ELISA KIT，货号：xlEm1065;Mouse PROG ELISA KIT，货号：xlEm0477;Mouse T ELISA KIT，货号：xlEm0476;Mouse T3 ELISA KIT，货号：xlEm0468;Mouse T4 ELISA KIT;Mouse TSH ELISA KIT，货号：xlEm0472;以上试剂盒规格：96孔/盒，abcam生产，鑫乐生物进口分装。

1.2 动物 昆明种小鼠，雌雄各半，60只，体重为18～22g，购于简阳达硕动物科技有限公司，合格证号：SCXK（川）2013-24。

1.3 仪器酶标仪，型号，Multlskan  Mk3，赛默飞世尔仪器有限公司生产。

1.4 分组与造模 SPF级昆明种小鼠60只，随机分为6组：正常组、模型组、阳性组、益肾补气强身茶高、中、低剂量组，每组10只。各组每天上、下午各强制游泳2h，水温（25±1）℃，水深20cm，连续7d，同时各组每天灌胃给药，阳性组生脉饮口服液10mL/kg，益肾补气强身茶高、中、低剂量组（5.08g/kg、2.54g/kg、1.27g/kg），正常组和模型组给予等体积蒸馏水，连续灌胃7d。

1.5 指标检测 采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法测定ACTH、CORT、E2、FSH、PROG、T，采用竞争法检测ALD、DHEA、LH、T3、T4、TSH。

1.6 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行处理，实验数据均以（x±s）表示，先用方差分析，再用q检验进行两两比较，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 益肾补气强身茶对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响 与正常组相比，模型组ACTH、ALD、DHEA含量升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比，高剂量组小鼠血清中ACTH、ALD、DHEA浓度降低，具有统计学意义（P<0.05），可见通过益肾补气强身茶的治疗之后，小鼠肾上腺激素水平有所改善。 见表1。

2.2 益肾补气强身茶对下丘脑-垂体-性腺轴的影响 与正常组相比，模型组血清FSH、LH水平上升，而E2水平下降，小鼠出现下丘脑-垂体-性腺轴紊乱情况，在服用益肾补气强身茶之后，与模型组相比，高剂量组小鼠血清中FSH、LH浓度降低，E2水平上升。E2的含量与FSH、LH含量负相关。 见表2。

2.3 益肾补气强身茶对下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响 与正常组相比，模型组小鼠血清T3浓度明显降低，T4浓度明显升高，两组数据均具有非常显著的统计学意义（P<0.01）。与模型组相比，高剂量组小鼠血清中T3浓度升高，T4浓度明显降低，具有统计学意义（P<0.05）。 见表3。

3 讨论

慢性疲劳是亚健康主要表现形式之一，建立CFS动物模型是研究CFS的基础[2]。强制游泳法是目前CFS单因素造模的主要方法之一，通过长时间游泳，造成躯体疲劳为主的动物模型。现代医学认为，长期的慢性应激是导致或诱发慢性疲劳的重要因素。该方法它既模拟了中医有关疲劳的发病过程，也符合西医所认为的由慢性应激导致疲劳的理论[3]。

目前对本病发病机制并不清楚，神经内分泌免疫系统的功能紊乱被认为是CFS的主要发病机理之一[4]，CFS患者除表现为慢性疲劳外，常伴随有记忆力下降、注意力难以集中、睡眠障碍、头痛、抑郁、焦虑等精神神经症状，说明中枢神经系统与内分泌系统的异常在的发生中扮演着重要的角色。神经系统和内分泌系统是相互协调、相互制约的两大调节系统，具有调节机体生命活动的功能。有研究者通过对患者的神经内分泌系统进行综合分析，发现 CFS 患者整体下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴以及各种调节机体代谢的激素水平失调共同导致机体处于一种低代谢状态，这与患者疲劳的状态密切相关[1，5-6]。甲状腺是人体内最大的分泌腺，它分泌的甲状腺激素T3、T4有促进生长发育过程等重要生理作用。T3中80%是由T4经过脱碘作用转变而来，这种脱碘过程是在5-脱碘酶作用下完成，当肾脏受到损伤时，5-脱碘酶活性会下降，导致T3含量下降，T4含量上升[7]，有研究表明补肾中药可促进T4转化为T3 [8]。肾藏精，《素问》中“肾者主蛰，封藏之本，精之处也。”指肾与生殖系统功能息息相关，在现代研究中，肾与下丘脑-垂体-靶腺轴腺靶激素水平息息相关，补肾药通过补肾，从而正相调节内分泌功能，肾精不足主要是下丘脑-垂体-性腺轴产生病理生理学改变，导致内分泌紊乱[9]。

本次实验结果，CFS模型小鼠ACTH、ALD含量升高，出现下丘脑-垂体-肾上腺功能亢进现象。使用益肾补气强身茶治疗后，治疗组小鼠ACTH、ALD、DHEA水平下降，可缓解肾上腺功能亢进，改善小鼠HPA轴功能。血清甲状腺激素含量较治疗前，T3水平有所上升，T4水平有所下降，可能是因为益肾补气强身茶修复肾脏损伤，促进T4转化为T3，维持了血中TSH、T3、T4的动態平衡，对下丘脑-垂体-甲状腺轴系统起到稳定和保护作用。血中TSH治疗前后变化不大，可能是益肾补气强身茶直接作用于肾脏，改善了T3、T4的分泌，而未作用于TSH受体，对TSH的分泌影响不大。CFS模型小鼠内分泌紊乱，导致E2含量下降，通过正反馈使FSH、LH含量升高，E2是雌激素中最主要活性最强的激素，是性腺功能启动的标志，E2、FSH、LH含量的变化是肾虚证的有效指标，这一结果说明肾虚会导致内分泌紊乱。益肾补气强身茶组E2水平有所升高，FSH、LH水平有所下降，出现E2抑制FSH、LH的现象，这可能是因为益肾补气强身茶通过提高E2水平，抑制了FSH、LH的分泌，从而调整小鼠的内分泌功能、缓解小鼠卵巢衰老。

综上，益肾补气强身茶能调节神经内分泌系统，增强下丘脑-垂体系统功能，治疗慢性疲劳综合征可能是通过改善应激引起的下丘脑-垂体系统内分泌紊乱，调节失调的激素水平。

参考文献

[1]蒙秀东，李昕，陈波，等.慢性疲劳综合征发病机制的研究进展[J].医学综述，2020，26 （2）： 361-364.

[2]呼德尔朝鲁，霍得逸，卢莎.单纯游泳运动构建慢性疲劳综合征小鼠模型[J].世界最新医学信息文摘，2017，17（100）：85-86.

[3]郑娟娟，赵毅，姚斐.慢性疲劳综合征的动物造模方法研究概况[J].时珍国医国药， 2009， 20（9）：2289-2291.

[4]孙朝晖.中药肉苁蓉的药理活性研究进展[J].赤峰学院学报（自然科学版），2010，26（2）：70-71.

[5]NIJHOF S L，RUTTEN J M，UITERWQQL C S，et al.The role of hypocorti-solism  in  chronic  fatigue syndrome[J].Psychoneuroendoc-rinology，2014（42）： 199-206.

[6]MIWA K. Down-regulation of renin-aldosterone and antidiuretic hormone systems in patients with myalgic encephalomyelitis /chronic fatigue syndrome[J].J Cardiol，2017，69（4） ： 684-688.

[7]邓昊，史红玲，裴冰，等.国内亚健康研究现状综述[J].牡丹江师范学院学报（自然科学版），2009（4）：33-36.

[8]李生祺，任树生，王鹏，等.慢性肾功能不全时的低T3、T4综合征[J].天津医药，1992（3）：150-152.

[9]徐孝平，潘永明，刘瑞敏，等.亚健康状态大鼠的神经-免疫-内分泌机制的研究[J].中国比较医学杂志，2012，22（8）：33-39.

（收稿日期：2020-06-16 编辑：程鹏飞）

基金项目：凉山州科技局应用技术研究开发项目（16YYJS0008）。

作者简介：童妍（1976-），女，漢族，博士，讲师，研究方向为中药药理。E-mail：tongyanmail@126.com

通信作者：罗伦才（1964-），男，汉族，本科，主任中药师，研究方向为民族药物的开发研究及临床应用。E-mail：1040710596@qq.com