孙尧荣 陈辉 颜辉辉 林丽

间质性膀胱炎（interstitial cystitis，IC）是一种慢性非细菌性膀胱炎性病变，以女性多见，主要临床表现有尿频、尿急、夜尿增多、膀胱和盆腔区疼痛等[1]。目前关于IC的病因及诊断标准尚不明确，也无有效的治疗方法[2]。许多IC患者因无法得到及时、有效的治疗，出现各种并发症，严重影响其生活质量[3]。近年来，膀胱组织血管生成机制是IC病因的研究热点，血管生成可能在IC的发展中起着重要的作用。本研究采用O'Leary-Sant问卷IC症状指数（interstitial cystitis symptoms index，ICSI）、IC 问题指数（interstitial cystitis problem index，ICPI）及视觉模拟评分法（visual analogue scale，VAS）评估女性IC患者尿频、膀胱疼痛等症状，同时检测膀胱组织血管生成相关因子[血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、CD31]表达，分析两者的相关性，以期寻找IC的潜在治疗目标。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2016年1月至2018年6月在台州市中西医结合医院就诊且确诊为IC（依据美国国立糖尿病、消化病及肾病协会制定的IC诊断标准[4]）的女性患者 45 例为 IC 组，年龄 30～74（56.7±11.3）岁；另选取同期在本院就诊、年龄匹配且无IC的正常女性45例为对照组，年龄 28～77（53.3±13.9）岁。排除标准：（1）资料不完整；（2）患有结石、尿路感染、膀胱癌、结核性膀胱炎及消化科或妇科相关疾病。本研究经医院伦理委员会审查通过，所有研究对象知情同意。

1.2 方法

1.2.1 IC症状、问题及疼痛量表评估 （1）O'Leary-Sant问卷：该问卷分为ICSI、ICPI两部分，ICSI主要评估患者症状的严重程度，ICPI主要评估症状对患者的困扰程度，两者均从夜尿、尿频、尿急、膀胱疼痛等4个方面进行评估，总分35分[5]。得分越高表示越严重。（2）VAS：主要评估患者疼痛程度，用0～10分表示，0分表示不痛，10分表示最痛[6]。

1.2.2 膀胱组织血管生成相关因子表达检测 采用免疫组化SP法。在尿道膀胱镜下取膀胱壁活检标本，4%多聚甲醛固定24 h，石蜡包埋，3 μm切片，梯度乙醇脱水，3% H2O2室温孵育10 min，抗原修复，3%山羊血清封闭，滴加一抗（VEGF或CD31抗体），4℃孵育过夜，PBS冲洗，滴加二抗，室温孵育2 h，DAB显色，苏木素复染，脱水，封片。在奥林巴斯CKX31倒置显微镜下观察并拍摄照片，细胞中有黄色、棕色或棕黄色颗粒及条索判定为阳性表达[7]。每个切片选取5个代表性视野，采用Image J 6.0软件检测阳性区域面积占该视野总面积的比例，即阳性表达占比。

1.3 统计学处理 采用SPSS 20.0统计软件。计量资料符合正态分布的用±s表示，组间比较采用两独立样本t检验；不符合正态分布的用M（P25，P75）表示，组间比较采用Mann-WhitneyU检验。ICSI、ICPI及VAS评分与膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达占比的相关性分析采用Spearman秩相关。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组对象ICSI、ICPI及VAS评分比较 IC组ICSI、ICPI及VAS评分均明显高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表 1。

表1 两组对象ICSI、ICPI及VAS评分比较（分）

2.2 两组对象膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达占比比较 IC组膀胱组织中VEGF、CD31阳性表达占比明显高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2和图1。

表2 两组对象膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达占比比较（%）

图1 两组对象膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达（VEGF为血管内皮生长因子，IC为间质性膀胱炎；免疫组化SP法，×200）

2.3 ICSI、ICPI及VAS评分与膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达占比的相关性 ICSI、ICPI及VAS评分与膀胱组织中VEGF、CD31阳性表达占比均呈正相关（均P＜0.05），见表 3。

表3 ICSI、ICPI及VAS评分与膀胱组织中血管生成相关因子阳性表达占比的相关性（r值）

3 讨论

IC的临床症状主要有夜尿、尿频、尿急、膀胱疼痛等，而O'Leary-Sant问卷恰好针对这4个方面进行评价[8]，目前主要用于IC症状及问题的评估。O'Leary等[9]认为ICPI或ICSI评分＞6分诊断IC的灵敏度高达0.900，特异性高达 0.950。Kushner等[10]也认为 O′Leary-Sant问卷在IC诊断中具有较好的灵敏度和特异度。此外，有学者认为VAS可用于IC患者的疼痛评价[11]。不少研究发现，IC患者在患病期间VAS评分较高[7，12]。因此，本研究采用O′Leary-Sant问卷、VAS评估女性IC患者尿频、膀胱疼痛等症状的严重程度。

血管生成是指在已有的微血管基础上，形成以毛细血管为主的新血管系统的过程[13]。血管生成会促进炎症的发展，炎症会刺激神经，导致IC患者产生疼痛[14]。叶雄俊等[15]研究发现，IC患者膀胱血管小球的形成与血管生成相关因子表达关系密切。张述蓉[16]对IC小鼠膀胱组织进行形态学观察，发现有血管扩张、炎细胞浸润、点状出血和上皮细胞坏死脱落等现象。目前，临床上也采用电凝来阻断IC患者膀胱壁上密集粗大的血管和血管网交叉点，同时电凝膀胱黏膜丝样出血点。以上结果提示，血管生成在IC发病过程中起重要作用。因此，本研究对女性IC患者尿频、膀胱疼痛与膀胱组织血管生成的关系作了深入探讨，结果发现IC组ICSI、ICPI及VAS评分及膀胱组织中VEGF、CD31阳性表达占比均明显高于对照组，且ICSI、ICPI及VAS评分与膀胱组织中VEGF、CD31阳性表达占比均呈正相关。由于女性IC患者尿频、膀胱疼痛与膀胱组织血管生成密切相关，抑制膀胱组织血管生成可能是IC的一个潜在治疗目标。