谢彩霞，汪志文，鲁义善，汤菊芬，简纪常

（广东海洋大学水产学院//广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东 湛江 524088）

罗非鱼（Oreochromis）是全世界广泛养殖的经济鱼类，有生长快、食性杂、适应性强等特点。我国是罗非鱼生产大国，但随着罗非鱼种质退化及养殖环境污染，各种疾病暴发，特别是无乳链球菌病，对罗非鱼养殖业造成较大影响[1-2]。无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）感染罗非鱼后最明显症状是，部分病鱼眼球突出、周围充血，鳃盖内侧发红、充血或出血，病鱼死亡率高达25%～80%[3-7]。

免疫机制研究已成为鱼类疾病预防的热点，PI3K/Akt 信号通路是细胞内极其重要的信号转导途径，磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）为该信号通路上主要调节蛋白，参与增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节。IA 类PI3K 是一种专性异二聚体，由一个催化亚基（p110）和调节亚基（p85）组成[8]，其中p110 由pik3ca基因编码，p85 由pik3r1基因编码。pik3r1是磷酸肌醇信号通路的重要调控基因，在哺乳动物中已证实参与多种免疫途径，目前对该基因的研究报道主要是在人的癌症[9-11]、肿瘤[12-13]、胰岛素调控[14]等方面，但在水产方面鲜有报道。笔者从尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）脾脏组织中克隆得pik3r1基因，研究该基因在健康及经无乳链球菌刺激的罗非鱼中的表达情况，为pik3r1在罗非鱼链球菌病防控方面研究奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

实验用尼罗罗非鱼 [(100 ± 10)g]购自湛江市东风市场，在（28±2）℃条件下暂养4 周后备用；大肠杆菌（Escherichia coli）DH5α 和无乳链球菌（S.agalctiaeZQ0910）菌种由广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室提供；……