麦伟虹，蓝海恩，廖玲玲，黄焕昌，陈钊

(广西畜牧研究所，广西 南宁 530001)

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起猪的一种急性、高度接触性、病毒性肠道传染病，各种日龄和品种的猪群均易感，临床中主要引起感染猪的腹泻、呕吐、脱水甚至死亡，对仔猪的致死率最高，危害最为严重[1-2]。该病于1971年首次发生于英国，我国于1980年首次发现该病，随后在我国一直呈散发性流行，但自2010年以来，随着PEDV变异毒株的出现，PED再一次在全球范围内暴发[3-4]。PEDV变异毒株较经典株的致病性显著增强，可引起仔猪严重呕吐和腹泻以及高发病率和高死亡率[5]。PEDV变异毒株在我国的肆意流行使PED迅速成为当前危害我国养猪产业的主要传染病和危害仔猪健康的头号传染病，同时也给PED的诊断和防控带来了新的挑战，加强针对PEDV变异毒株的新型疫苗与诊断试剂研究已迫在眉睫。PEDV的小包膜糖蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)均是PEDV的主要结构蛋白和重要功能蛋白，在PEDV与宿主的侵染过程中发挥重要作用。M和N蛋白的深入研究，将为PEDV毒株变异机制研究、新型疫苗与诊断试剂研制提供分子水平上的依据[6-7]。鉴于此，本研究利用原核表达技术对PEDV变异毒株的M和N蛋白进行了融合表达，并检测了融合蛋白的免疫原性，为PEDV变异毒株M和N蛋白的结构与功能、新型疫苗与诊断试剂的研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

病毒基因组提取试剂盒为美国Axygen公司产品；一步法RT-PCR扩增试剂盒、EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、SpeⅠ核酸限制性内切酶均为日本TaKaRa公司产品；……