孔浩然，闫艺洁，吴尚桦，施之强，赵玉洁，路桂霞，汪菲，孙裴，王勇，徐前明

(安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036)

泰勒虫(Theileriaspp.)是一类重要的血液原虫，由它引起的泰勒虫病往往对养殖业造成巨大的危害，常给畜牧业造成重要的经济损失[1]。泰勒虫通过蜱虫传播，其特征主要是在宿主淋巴细胞的细胞质内形成裂殖体，无性生殖所生成裂殖子可感染循环的红细胞[2]，有性生殖发生在蜱虫的肠道中，但移行入蜱唾液腺可发育至子孢子[3]。 我国至今已报道的Theileria有9种，其中的吕氏泰勒虫便是其中之一，从绵羊群体中检测较多，而山羊泰勒虫病报道较少。

泰勒虫主要寄生于红细胞和网状内皮细胞内，由于它形态较小，采用形态学诊断方法较为困难。分子生物学方法常用于血液原虫的诊断，多种PCR技术运用检测巴贝斯虫和泰勒虫已被报道。常用鉴定泰勒虫的基因主要有18S rRNA、5.8S rDNA、线粒体细胞色素b基因、ITS-1、ITS-2基因，其中18S rRNA和5.8S rDNA等基因相对保守。目前，关于山羊泰勒虫分子鉴定主要采用PCR方法和定量PCR方法，套式PCR技术在诊断山羊泰勒虫病方面国内外尚未见报道。本试验基于已报道的山羊吕氏泰勒虫18S rRNA基因序列设计2对引物，建立了山羊吕氏泰勒虫套式PCR检测体系，为该病的分子流行病学调查、快速诊断和防治提供工具。

1 材料与方法

1.1 病例来源

山羊来自于安徽定远县某山羊场300只山羊，以放牧为主要饲养方式，当地具有蜱虫活动史。

1.2 主要试剂

琼脂糖、SDS和Tris碱，均购自北京鼎国生物技术有限公司；……