简论高效液相色谱峰异常现象
2020-01-13赵胜延张秉慧宋艳真付梦飞
中兽医学杂志 2020年8期
赵胜延,张秉慧,宋艳真,付梦飞,施 萍
(1.河南省畜产品质量监测检验中心许昌分中心,河南 许昌461000;2 许昌市动物疫病预防控制中心,河南 许昌461000)
液相色谱是利用混合物中各组份在不同两相中溶解、分配、吸附等化学作用性能的差异,当两相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离,两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一相是流动的,称为流动相。该方法逐渐更多地收编入《中华人民共和国兽药典》,广泛应用兽药检验检测中,如中药黄芪多糖注射液、板蓝根注射液的含量检测,部分兽药的性状鉴别。该方法是一种在定性基础上需有纯物质作为标准物质的相对定量分析。大多情况下,只要检测方法、仪器条件设置正确,都能达到理想分析结果,但实践中由于种种原因,存在目标峰未出现、峰形异常、保留时间漂移等现象。现就笔者工作中遇到的问题,进行归纳、整理、分析,总结如下,供同行参考。
1 未出现目标峰
1.1 色谱柱的选择 如方法规定C18 色谱柱,由于粗心错用了C8 色谱柱,因固定相的不同,使样品中被测成分不能在固定相中被分离和吸附。
1.2 流动相使用不当 流动相是携带待测物质向前移动的物质,对待测物质具有一定的溶解能力,且不与待测物质发生化学反应,若流动相选择错误,致使待测物质不能在固定相中被吸附和分离。
1.3 检测器选择不当 检测器大致分紫外、荧光、示差、二极管检测器等,每种物质都有自身特性,有的有紫外吸收基团,有的是荧光基团,具有荧光性的物质,需要激发和发射波长,如检测鸡蛋中氟喹诺酮类物质,物质的自身特性,只能用荧光检测器时行检测。……
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