高效液相色谱法测定熏烧烤肉中16种多环芳烃

2020-01-06鹿文婷济南市章丘区疾病预防控制中心

食品安全导刊 2019年30期

□ 鹿文婷万洁宁霞济南市章丘区疾病预防控制中心

多环芳烃（PAHs）是指2个或2个以上苯环以稠环形式相连的一类化合物，包括萘、蒽、菲与芘等150余种化合物，具有慢性毒性和致癌、致畸、致突变作用[1]。人类暴露于多环芳烃的主要途径是食物，尤其是在熏烧烤肉制品中，屡有检出。多环芳烃的检测分析一般采用液相色谱法和气相色谱－质谱联用法，气—质联用法的定性能力强于液相色谱法，但对多环芳烃的定量能力不强[2]。本文采用乙腈—正己烷—超声提取，固相萃取柱净化，高效液相—二极管阵列—荧光检测器串联检测，建立了一种高效、准确、能够同时测定熏烧烤肉制品中16种多环芳烃的高效液相色谱法。

1 试验

1.1 仪器与试剂

电子天平（Sartorius Quintix224—1CN，德国）；超声波清洗仪（KQ—250DB，昆山市超声仪器有限公司）；氮吹仪（Organomation N—EVAP112，美国）；涡旋混匀器（Scientif i c Industries VORTEX—GENIE2，美国）；低温高速离心机（ThermoFisher，美国）；高效液相色谱仪（Waters e2695，美国），配备二极管阵列及荧光检测器；超纯水仪（Millipore Rios8，美国）。弗罗里硅土固相萃取柱（Waters，美国）；乙腈（HPLC，德国Merck公司）；二氯甲烷（GR，天津市大茂化学试剂厂）；正己烷（HPLC，天津市科密欧化学试剂有限公司）。

16种多环芳烃混合标准物购自DIKMA公司，包含萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、二苯并[a，h]蒽、苯并[g，h，i]苝与茚并 [1，2，3—c，d]芘。

1.2 试验方法

1.2.1 样品处理

按照 GB 5009.265—2016《食品安全国家标准食品中多环芳烃的测定》[3]进行试样前处理。

1.2.2 分析条件

色谱柱：PAH C18柱（25 mm×4.6 mm×5 μm）；流动相：A为乙腈，B为水；洗脱程序：0～20 min，50% ～ 100%A；28～ 32 min，100%～ 50%A；流速：1.5 mL/min。用二极管阵列检测器检测苊烯，波长为230 nm；其他15种PAHs用荧光检测器检测，激发波长和发射波长见表1。

2 结果与讨论

2.1 色谱图与条件优化

采用二极管阵列检测器在20～400 nm对标准溶液进行光谱扫描，发现苊烯在230nm波长下响应值最高，因此紫外吸收检测波长为230nm。这与高慧[4]等人的检测数据相吻合。

表1 PAHs激发波长、发射波长及切换色谱时间检测参数

配制浓度为100 ng/mL的16种PAHs混合标准溶液，选用PAHs专用色谱柱进行分离检测，分离效果良好，见图1和图2。

2.2 线性范围与检出限

在1.0～100 ng/mL线性范围内，16种PAHs的回归方程均呈现良好的线性关系（R＞0.999）。一般以方法检出限作为其检出限，称取试样2.0 g，定容体积为1.0 mL，16种PAHs的检出限为：蒽、苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、二苯并[a，h]蒽、苯并[g，h，i]苝和茚并[1，2，3—c，d]芘 0.66 μg/kg，菲 4.0 μg/kg，萘6.6 μg/kg，荧蒽1.0 μg/kg，苊、芴、芘和苊烯 1.3 μg/kg。