(三门峡市中心医院，河南 三门峡 472000)

性激素具有促进性器官发育、维持性征及性功能等作用，其水平对于诊治相关疾病，了解患者内分泌功能具有重要价值[1]。性激素检测常规6项为：促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(TESTO)、孕酮(PROG)、催乳素(PRL)[2]。其常用检测方法是化学发光免疫法，但不同仪器不同系统间发光原理差异致使性激素检测结果不尽相同[3]。因此为能更准确服务于临床，有必要对不同方法进行比对试验和一致性探讨。目前临床占有率较高的三种方法为直接化学发光免疫分析法(CLIA)、化学发光酶免疫分析法(CLEIA)及电化学发光免疫分析法(ECLIA)。本次研究旨在比较CLIA、CLEIA及ECLIA检测性激素水平的结果差异。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取三门峡市中心医院检验科2015年3月～2018年3月门诊患者经CLIA检测性激素水平后剩余无溶血新鲜血清标本240份。女194例，男46例；年龄3～65岁，平均(25.31±8.67)岁。样本浓度范围：FSH 1.17～142.26 IU/mL，LH 0.25～150.48 IU/mL，E2 8.23～164.23 pg/mL，TESTO 0.02～14.19 ng/mL，PROG 0.11～23.43 ng/mL，PRL 0.15～82.73 ng/mL。

1.2 仪器与试剂

CLIA应用西门子拜耳ADVIA Centaur 全自动化学发光免疫分析仪及其配套试剂及标准品，CLEIA应用安图全自动化学发光酶免仪A2000及其配套试剂及标准品，ECLIA应用罗氏cobas e411全自动电化学发光仪及其配套试剂及标准品。精密度评估时，三台仪器均使用Bio-Rad公司生产的免疫学定值质控品检验。

1.3 方法

1.3.1 参考EP15-A2文件[4]，对3台仪器应用配套标准品校正，应用Bio-Rad公司低(批号：40231)、中(批号：40232)、高(批号：40233)免疫学定值质控品每天各检测3次，连续检测5d。计算总变异系数(CV)，CV =标准偏差/平均值×100%。

1.3.2 参考EP9-A2文件[5]，每天应用CLEIA及ECLIA测定同样7份标本，连续检测20 d。当2种方法间测定值差异超过平均偏差4倍时，重复测定，若重复测定值差异小于8.3%采用首次测定结果，若差异大于8.3%剔除标本。比较CLIA、CLEIA、ECLIA检测性激素水平结果，计算CLEIA及ECLIA与CLIA间和CLEIA与ECLIA间的线性回归方程和相关系数r2。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 三种仪器6种性激素项目总CV

三种仪器6种性激素项目不精密度CV 均小于1/3TEa(8.30%)，符合CLSI室间质评定值范围[7]。见表1。

表1 三种仪器6个性激素项目总CV %

2.2 三种方法检测性激素水平结果

FSH、LH、TESTO、PRL检测三种方法相互间结果一致(r2≥0.95)；E2检测三种方法相互间结果不一致(r2<0.95)；PROG检测CLEIA与ECLIA结果一致(r2≥0.95)，CLIA与CLEIA、ECLIA与CLIA间结果不一致(r2<0.95)。见表2。

表2 三种方法检测性激素水平结果

3 讨论

性激素的化学本质是脂质，与细胞浆内特定受体蛋白结合，生成激素-受体复合物，与细胞核内染色质相作用，影响DNA的转录及复制，从而调控细胞的生长、代谢和分化[2]。CLIA是将化学发光测定技术与免疫反应相结合，用于检测分析的技术。CLEIA 以酶标记生物活性物质进行免疫反应，酶反应底物作为发光剂，在信号试剂作用下发光，用发光信号测定仪进行发光测定。ECLIA指由电化学反应引起的化学发光过程，反应在电极表面进行，发光底物激发光反应。本次研究中三种仪器不精密度CV 均小于1/3TEa，符合CLSI室间质评定值范围，可进行比较。三种方法检测FSH、LH、TESTO、PRL结果一致(r2≥0.95)；检测E2相互结果不一致(r2<0.95)；检测PROG时CLEIA与ECLIA结果一致(r2≥0.95)，CLIA与CLEIA、ECLIA与CLIA间结果不一致(r2<0.95)。研究结果提示不同化学发光免疫法检测性激素水平时存在差异。因不同仪器的抗体来源、包被方式、发光原理等差异，不同检测方法检测性激素项目时结果可出现差异。因此，为保证临床检验结果的唯一性及一致性，有多种化学发光免疫法检测仪器的医院应定期对不同仪器的检测结果进行比对，考虑结果可比性因素。对能够结果具有一致性的项目，以一种检测方法为主；而检测结果不一致的项目，建议与其它如酶联免疫法、免疫放射法等检测结果进行比较，选择结果最具相关性的化学发光免疫法。