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9种病原体检测对儿童呼吸道感染的临床分析意义

2020-01-03

山西卫生健康职业学院学报 2019年5期
关键词:载玻片流感病毒病原体

(太原市妇幼保健院,山西 太原 030012)

呼吸道感染是目前临床上较为常见的儿科病症之一,具有病原复杂化、多样化的特点[1,2]。目前没有唯一的判断依据和标准来鉴别感染类型,病原培养过程较长,不符合对儿童进行快速诊治的要求。本研究针对呼吸道感染患儿展开调查研究,为呼吸道感染的研究提供病原学调查依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从太原市妇幼保健院在2017~2018年收治的确诊为呼吸道感染的门诊和住院的患儿中,筛选出1 248例患儿作为本次研究的样本对象。纳入标准[3]:年龄在12周岁及以下;入院时发热达到38℃以上;有呼吸道如咳嗽、咯痰等症状;经检查体内炎性指标增高,胸片可见肺部病变;参与研究的患儿及其家属对研究内容均知情,且明确表示同意参与。排除标准[4]:排除因结核或其他感染等引起呼吸道症状的患儿;排除患儿合并其他严重器质性病变或肝肾功能不全者;排除肺部肿瘤或存在呼吸道严重合并感染。在参与研究的患儿当中,共有男753例,女495例,平均年龄(7.82±2.56)岁,病程在3~78 d之间,平均(31.57±10.08)d。

1.2 方法

在患儿及其家属同意参与研究后对其进行血清样本采集,对收集好的样本进行妥当保管并定时批量检验。患儿的血清样本采用间接免疫荧光法对其进行检测,检测时注意剔除存在血脂过量或其他受到不明污染的血清样本。将制备并稀释好的血清滴与含有抗原的载玻片上,同时向载玻片孔内加入阴性阳性质控品,观察标本中是否出现特异性抗体与抗原结合。当特异抗体与相应抗原结合,则对载玻片使用磷酸缓冲液和蒸馏水进行清洗,以除去实验中未与抗原结合的IgM。待载玻片干燥后加入荧光素结合物,等待其与样本充分发生反应后,重复对载玻片使用磷酸缓冲液和蒸馏水的清洗,在进行封闭处理后进行观察。观察仪器为日本OLYMPUS倒置荧光显微镜IX53,试剂盒采用西班牙VIECELL公司呼吸道感染病原IgM九联检试剂盒[国食药监械(进)字2010第3400365号]。

1.3 观察方法

载玻片上的9种病原体分型为嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、贝纳柯克斯体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒及副流感病毒1、2、3 型。其中,当腺病毒、呼吸合胞病毒、甲型流感病毒和副流感病毒为阳性时,载玻片上的观测结果为细胞核体及其细胞质呈现绿色荧光;当病毒为阳性时,载玻片上的观测结果为菌体呈现绿色荧光;细胞外呈现绿色荧光。而当病毒为阴性时,载玻片上的观测结果无荧光可见;细胞呈红色。观察载玻片荧光检测性状并记录病原分布情况。

按照世界卫生组织2018年年龄划分标准[5]将研究对象划分为婴儿组(出生后28 d~1周岁之间),幼儿组(1~3岁之间),学龄前儿童组(4~6岁之间),学龄儿童(7~12岁之间)。观察不同年龄段之间的病原阳性检出率情;同时根据患儿感染时间,将样本按照春季(3~5月)、夏季(6~8月)、秋季(9~11月)、冬季(12月~次年2月)进行划分,观察不同季节间的病原阳性检出率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.00对采集到的数据进行分析,计数资料用%表示,使用χ2检验,当P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 呼吸道病原体检测概况

在1 248例患儿中有363例患儿为9种呼吸道病原体阳性,阳性检出率为29.09%。其中753例男性患儿中检出221例患儿为阳性,检出率为29.34%,在495例女性患儿中检出142例患儿为阳性,检出率为28.69%,两个性别的阳性检出率差异无统计学意义(χ2=0.06,P=0.80)。在363例检测为阳性的患儿当中,检出单种病原感染的患儿为269例,检出两种及以上病原感染的患儿为94例。

2.2 阳性患儿中的病原体分布概况(见表1)

2.3 不同年龄患儿之间的阳性检出率比较(见表2)

2.4 不同季节之间患儿的阳性检出率比较(见表3)

表1 阳性患儿中的病原体分布情况[n(%)]

表2 不同年龄患儿之间的阳性检出率比较[n(%)]

表3 不同季节之间患儿的阳性检出率比较[n(%)]

3 讨论

临床上根据感染位置的不同将呼吸道感染分为上呼吸道感染与下呼吸道感染,随着细菌敏感型抗生素的推广和使用,由细菌类典型病原体引起的呼吸道感染得到了有效的控制[6]。而目前临床上所常见的呼吸道感染多由非典型性病原体引起,由于此类病症在感染早期难以通过明显症状或指标判断病原类型,无法针对其类型采取抗菌或抗病毒治疗,从而极易引发用药不当或治疗不及时等问题的出现[7]。因此对呼吸道感染开展病原学研究和流行病学调查,对此类疾病的防治工作开展有着较为重要的意义。

本研究采用IgM抗体检测法,在1 248例患儿当中检出363例患儿为9种呼吸道病原体阳性,总阳性检出率为29.09%;而363例病原体阳性的患儿当中,肺炎支原体检出阳性的患儿比例为最高30.03%,与王芳等[8]研究结果相比较低;其次则是乙型流感病毒7.63%,与王丽等[9]研究结果相比较为一致。此种差异主要源于呼吸道感染的流行特征受到地域、当地医疗水平、年份等因素的影响,故在不同地区、不同时间的研究结果也可能存在一定差异,对于本研究的未检出阳性病例,可能与患儿体内的抗体水平和其他无法覆盖的病原体类型有关,此点与国内外一些研究的结果较为一致[10]。

从四个年龄段的病原学检查情况来看,婴儿组的肺炎支原体阳性比例最高为38.28%,其次是乙型流感病毒为23.26%,在总检出情况上婴儿的阳性例数也较其他年龄段更高,这提示由于刚刚渡过新生儿时期的婴儿其身体抵抗力较其他年龄段更弱,且其器官功能发育未完全,此时间段内任何感染源都易引起呼吸道感染,因此该群体拥有更高的发病率。其次,研究结果中还表明,学龄儿童组中的阳性检出例数也较高,肺炎支原体阳性检出比例21.88%也较高,其原因可能与学龄儿童常常处于学校等人员较为密集且活动集中的地点有关,因此对学校开展一定的卫生宣讲教育在呼吸道感染的防治上具有重要意义。从不同季节的病原学检查情况来看,呼吸道感染在不同季节表现出了明显的差异,从阳性检出例数来看,春季和冬季的阳性检出例数最高,且肺炎支原体、乙型流感病毒、嗜肺军团菌血清1型三种病原体在冬季的阳性检出率较其他季节更高。以上结果表现,冬季由于气温较低,空气流动较弱,人群也极易长时间处在密闭的空间内,使得呼吸道疾病极易在室内传播,同时由于多数城市冬季与春季间交替不明显,因此在春季时呼吸道感染的病原检出率也较夏季和秋季更高。

综上所述,目前临床上儿科呼吸道感染的病原体以肺炎支原体、乙型流感病毒和嗜肺军团菌为主,同时伴有其他多种非典型病原合并感染,因此在治疗前对患儿进行较为全面的病原学检查,对于治疗非典型病原感染引起的的呼吸道疾病有着重要意义。

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