孟凡涛，刘 晶，王文涛，代娟娟，游晶晶，胡凤爱，李 晨

抑郁症又称抑郁障碍，是一种普遍存在的、严重的、并且容易复发的精神疾病，以显著而持久的心境低落和快感缺失为主要特征[1]。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)是一种重要的神经营养因子，其基因存在多种剪切体，并且每个剪切体都有特定的启动子调控[2]。研究[3-5]报道前额叶皮层和海马的BDNF在抑郁症发病、围产期应激或青少年应激诱导成年后抑郁行为以及抗抑郁治疗中起着重要作用。此外，研究报道中缝背核5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)神经元广泛地投射到海马和前额叶皮层脑区[6]；中枢神经系统中5-HT功能降低、释放减少及突触间隙含量下降与抑郁症的发生密切相关[7-8]。但是中缝背核脑区BDNF在抑郁症发病中的作用尚未报道。该研究利用慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress，CUS)小鼠抑郁模型，结合实时荧光定量PCR(Q-PCR)和Western blot检测中缝背核脑区BDNF的变化情况，为研究抑郁症的发病机制提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验动物 20只雄性SPF级C57BL/6小鼠购自济南朋悦实验动物繁育有限公司(生产许可证号：SCXK(鲁)20140007)，自由饮水和饮食，环境温度19～22 ℃，相对湿度40%～60%。本研究中动物实验均经本单位动物伦理委员会批准。

1.1.2主要试剂和仪器 总RNA提取试剂盒(美国Omega公司)；RNA反转录试剂盒(大连宝生物工程有限公司)；RIPA裂解液(上海碧云天生物技术有限公司)；兔抗BDNF单克隆抗体，鼠抗5-HT多克隆抗体(英国Abcam公司)；鼠抗β-actin单克隆抗体(美国Cell signaling公司)；羊抗兔二抗IR Dye800CW，驴抗鼠二抗IR Dye680LT，双红外激光成像系统Odyssey Sa(美国Li-COR公司)；ALexa fluor 488驴抗鼠荧光二抗、ALexa fluor546驴抗兔荧光二抗(美国Thermo Fisher公司)。……