艾地苯醌改善血管性痴呆大鼠认知功能及其对海马区生长相关蛋白-43和突触素P38表达的影响
2020-01-01钱旭东王东徐倩倩李国芸王红梅张晓璇马征
钱旭东,王东,徐倩倩,李国芸,王红梅,张晓璇,马征
我国血管性痴呆(vascular dementia,VD)的发病率不断上升,痴呆患者中约1/5是VD患者[1,2]。突触是神经信息传递与处理过程的中心环节,神经突触的超微结构与认知功能密切相关[3,4]。艾地苯醌能促进VD大鼠海马组织脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达,而BDNF与其受体共同作用可促进突触再生,提高突触可塑性,改善VD大鼠痴呆状况[5-7]。为进一步明确艾地苯醌对VD大鼠海马区突触的影响,本研究从突触相关蛋白的表达和突触的超微结构的角度进行深入研究。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF级健康SD雄性大鼠60只,体质量250~300 g,7周龄。动物使用许可证号:SCXK(冀)2008-1-003;动物合格证编号:1404010;河北医科大学实验动物中心提供。在湿度50%~70%、室温20℃~25℃中饲养,每笼5只,喂养普通颗粒型大鼠饲料。
1.2 方法
1.2.1 试剂与仪器 小鼠抗大鼠生长相关蛋白43(growth associated protein-43,GAP-43)、突触素P38抗体购于武汉博士德生物工程有限公司;HRP标记的二抗(山羊抗小鼠)购自Abcam公司;Western Blotting ECL化学发光检测试剂盒购自美国Bio-Rad公司;ZS-001 Moriss水迷宫购自北京众实迪创科技发展有限公司。
1.2.2 动物建模与分组 按照随机数字表将大鼠分为手术组40只及假手术组20只。手术组采用改良双血管阻断(2-vessels occlusion,2-VO)法建立大鼠VD模型:大鼠采用异氟烷吸入麻醉后先分离右侧颈总动脉双重结扎。1周后以同样方法双重结扎左侧颈总动脉。假手术组大鼠只分离颈总动脉,不进行结扎。模型建立8周以后,通过Morris水迷宫测试挑选成功建模的大鼠40只。(模型组逃避潜伏期均值-对照组逃避潜伏期均值)/模型组逃避潜伏期均值≥0.2为模型成功判断标准。……
