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核糖体蛋白RPL34-PS1对B细胞淋巴瘤的生长促进作用

2019-12-21周芳超刘金晶郁多男

盐城工学院学报(自然科学版) 2019年4期

周芳超,蒋 静,2,刘金晶,郁多男

(1.扬州大学 医学院,江苏 扬州 225001;2.扬州大学 转化医学研究院,江苏 扬州 225009)

淋巴瘤是起源于淋巴结和淋巴组织免疫系统的恶性肿瘤,淋巴瘤大致可分为非霍奇金淋巴瘤(90%)和霍奇金淋巴瘤(10%)。大多数淋巴瘤(90%)起源于B细胞,但也可能是T细胞或自然杀伤细胞[1]。B细胞淋巴瘤是B细胞发生的恶性实体肿瘤,涉及免疫球蛋白位点的染色体易位是许多B细胞淋巴瘤的标志。然而,其他例如环境因素DNA复制错误等也在B细胞恶性肿瘤的发病机制中起重要作用[2]。核糖体蛋白(ribosomal protein,RP)是核糖体的重要成分之一,它可以和RNA结合形成核糖体并起到合成蛋白质的作用。RP除了参与蛋白质的合成以外,还能够参与调控细胞增殖,凋亡和分化以及参与DNA的复制[3],目前也有报道核糖体蛋白异常表达会导致恶性血液疾病[4],同时部分核糖体蛋白也被报道能参与调控胃癌,但是对于核糖体蛋白与淋巴瘤之间的关系,目前尚无报道。本实验旨在证明一种核糖体蛋白RPL34具有显著促进B细胞淋巴瘤生长的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞株和试剂

小鼠B淋巴瘤细胞(由本实验室组负责人郁多男教授构建);Alph MEM细胞培养基、胎牛血清(美国Hyclone公司);Annexin V Alexa Fluor647/PI/Appotosis dection kit(南京福麦斯生物公司);BrdU细胞周期检测试剂盒(美国BD生物公司)。

1.2 稳定过表达RPL34的B淋巴瘤细胞系构建

在pubmed上查询到RPL34的基因序列后,设计引物通过PCR的方法体外扩增RPL34的序列后,通过分子克隆将RPL34的序列插入逆转录病毒载体pBABE-Puro中,包装病毒并感染38B9细胞48 h后用0.6 μg/μL的嘌呤霉素连续筛选7 d即得到稳定表达RPL34的B淋巴瘤细胞系RPL34-38B9。……

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