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饿蚂蝗对动物消炎止痛的作用研究

2019-12-19袁冬磊谢莹王颖

山西农经 2019年19期

袁冬磊 谢莹 王颖

摘 要:为了研究喂食不同浓度饿蚂蝗水煮液对炎症模型大鼠的痛觉调节作用,通过在大鼠足底注射鹿角菜致炎,对炎症大鼠喂食浓度分别为5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的饿蚂蝗水煮液,采用行为测痛的方法记录与观察在5 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min和60 min时间点上的大鼠后爪缩爪反应潜伏期(Hindpaw Withdrawal Latency,HWL),与喂食生理盐水作为比较,观察饿蚂蝗水煮液对炎症模型大鼠痛觉调节活动的影响。结论:在将饿蚂蝗水煮液喂食给炎症大鼠之后,与注射同等剂量的生理盐水相比,HWL明显延长。饿蚂蝗水煮液明显延长了炎症模型大鼠的HWL,表明饿蚂蝗水煮液对炎症大鼠具有一定的消炎止痛作用,即饿蚂蝗水煮液参与了炎症模型大鼠的痛觉调节。

关键词:饿蚂蝗水煮液;致炎大鼠;消炎止痛

文章编号:1004-7026(2019)19-0106-05        中国图书分类号:R285         文献标志码:A

饿蚂蝗又名山蚂蝗、胃痛草,为豆科蔷薇目双子叶被子植物,主要生长于海拔600~2 300 m的山坡草或林缘。饿蚂蝗植物资源丰富,分布于广西、贵州、云南等地,其性凉、味苦,据《中华本草》记载有活血止痛、解毒消肿等功效。现代研究表明,饿蚂蝗的成分主要有有机酸、黄酮类、酚类以及三萜类,至今尚未发现有饿蚂蝗对动物发挥消炎止痛作用的相关研究[1-2]。

为了对饿蚂蝗所发挥的消炎止痛效果进行深入研究,试验选用鹿角菜来使大鼠致炎,通过喂食饿蚂蝗水煮液的方法,利用压板及热板测痛仪对大鼠开展痛觉测验,以此来研究饿蚂蝗所发挥的消炎止痛作用,以期为其镇痛作用机制的研究提供初步方向。

1  试验材料

1.1  试验动物

试验使用雄性Wistar大鼠8只,体重控制在200~210 g之间。在试验的过程中,大鼠必须分笼喂养,自由进水进食,维持充足的光照,其温度应当维持在(22±2)℃,确保稳定的生活条件。试验过程中必须尽可能降低大鼠的使用频率,尽量避免大鼠受到其他因素的影响。

1.2  试验试劑

饿蚂蝗:购买于义善堂大药房。

生理盐水:长春豪邦药业有限公司制造。

鹿角菜:SIGMA公司制品。

1.3  试验仪器

灌胃针:深圳瑞沃德公司。

智能热板仪(YLS-6B)和电子压痛仪(YLS-3E):安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司。

2  研究方法

2.1  炎症大鼠模型建立

通过将鹿角菜注射在大鼠的右侧足底(鹿角菜必须现用现配,避免变质),创建起致炎大鼠模型。注射时间应当保持在行为测试之前的3 h,在注射之后的3~4 h,大鼠的后爪将会红肿发炎,皮温将会显著提升,这时可以开始进行判断炎症轻重的痛觉测试。在进行相关试验之前,需要对大鼠开展压板及热板的测试训练,其核心目的在于促使大鼠充分熟悉测试环境,从而尽可能减少因不熟悉环境而产生的误差。训练维持一周,4轮/d,3次/轮。

2.2  饿蚂蝗水煮液母液及不同浓度水煮液的制备

将饿蚂蝗进行称量,并置于瓷缸中,加水煮沸取水煮液的母液,之后利用该母液来配制5.5 mg/mL、11 mg/mL、22 mg/mL的饿蚂蝗水煮液。

2.3  行为痛觉测试

热板测试:利用智能热板仪来开展测试,该仪器的温度应当维持在(52±0.3)℃。用左手抓住大鼠,右手抓出大鼠待测腿的髋关节处,确保大鼠的腿完全伸直,使其测试爪可以与热板面接触。同时触动踏板开关,并计时,后爪将会自主缩回并离开热板表面,再次触动开关以停止,将这个时期作为后爪缩回反应潜伏期的HWL。在试验过程中应尽量确保运用热板的相同位置,以避免误差的产生。

压力测试:采用电子压痛仪来开展测试。用左手抓住大鼠,右手抓出大鼠待测腿的髋关节处,避免大鼠的腿出现弯曲,将其爪子与试验板面进行接触,同时触动相应的踏板开关,将相应的玻璃落到大鼠的后爪之上,其压力将会以30 g/s的速度增加,采用相同的方法检测大鼠机械刺激的HWL。

经过训练之后,大鼠对热刺激所产生的HWL将不会超出5 s,对于机械性刺激所形成的HWL不能超出6 s。在喂食药物之前先需要检测3组HWL,并将此作为基础值。在药物注射之后各个时间点的HWL都应当与基础值进行对比反映。

2.4  数据统计分析方法

试验数据以均值±标准误(x±s)的形式表示,组间比较采用独立样本t检验统计数据并处理,*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001均表示统计结果具有显著性。

3  结果与分析

试验给致炎大鼠喂食浓度分别为5.5 mg/mL、11 mg/mL和22 mg/mL的饿蚂蝗水煮液3 mL,采用压板及热板测试,并对饿蚂蝗水煮液对热刺激和机械刺激所造成的HWL进行记录。

分别将生理盐水和饿蚂蝗水煮液(5.5 mg/mL)喂食给炎症模型大鼠,并将两者进行对比,大鼠对机械及热刺激所产生的HWL变化详见表1。与生理盐水组对比,饿蚂蝗水煮液喂食组大鼠左、右爪因受到机械刺激所产生的HWL的差异具备显著性(p<0.01;p<0.01),左爪热刺激不存在显著性(p>0.05),右抓有显著差异(p<0.05)。

分别将生理盐水和饿蚂蝗水煮液(11 mg/mL)喂食给炎症模型大鼠,并将两者进行对比,大鼠对机械及热刺激所产生的HWL的变化详见表2。与生理盐水组相比,饿蚂蝗水煮液喂食组大鼠左、右爪机械刺激所产生的HWL存在较显著的差异性(p<0.01;p<0.01),左、右爪热刺激均存在显著的差异性(p<0.05;p<0.01)。

分别将生理盐水和饿蚂蝗水煮液(22 mg/mL)喂食给炎症模型大鼠,并将两者进行对比,大鼠对机械及热刺激所产生的HWL的变化详见表3。与生理盐水组相对比,饿蚂蝗水煮液喂食组大鼠左、右爪机械刺激所产生的HWL的差异具有显著性(p<0.01;p<0.01),左爪热刺激为显著(p<0.01),右爪热刺激为极显著(p<0.001),这表明大鼠的HWL得到了极大的延长。

结果表明,饿蚂蝗水煮液对炎症模型大鼠具有一定的消炎镇痛效果,并且5~10 min之内的效果为最佳,详见图1,同时对药物剂量存在一定的依赖性。

4  结论与讨论

通过试验观察,炎症模型大鼠灌5.5 mg/mL饿蚂蝗水煮液后的左、右爪热刺激的HWL都存在显著性差异(p<0.05;p<0.05),炎症模型大鼠的右爪热刺激存在显著性差异(p<0.05)。喂食生理盐水和喂食饿蚂蝗水煮液(11 mg/mL)的炎症模型大鼠进行对比,炎症模型大鼠灌11 mg/mL饿蚂蝗水煮液之后,其左右爪机械刺激的HWL都存在显著性差异(p<0.01;p<0.01),左、右爪热刺激存在显著性差异(p<0.05;p<0.01)。给炎症模型大鼠喂食22 mg/mL饿蚂蝗水煮液与灌生理盐水作对照,炎症模型大鼠灌22 mg/mL饿蚂蝗水煮液之后的左、右爪机械刺激的HWL都存在显著性差异(p<0.01;p<0.01),左爪热刺激为显著(p<0.01),右爪热刺激为极显著(p<0.001),这就表明大鼠的HWL得到了极大延长。

试验结果表明,饿蚂蝗水煮液对炎症模型大鼠具有一定的消炎镇痛效果,并且5 min之内的效果为最佳,同时对药物剂量存在一定的依赖性。此外,已有相关学者研究对动物消炎止痛的相关药物应用于畜牧生产中。

饿蚂蝗成分包括黄酮类、生物碱类、萜类、多酚类及挥发油类等[3-6]。其中黄酮可以抑制炎性生物酶的渗出,可以增进伤口愈合和止痛,已有研究證实,黄酮类化合物对炎症性疼痛具有缓解作用其作用机制为抑制环氧化酶和脂氧化酶的活性而起到抗炎镇痛作用[7]。所以,饿蚂蝗镇痛作用的机制有可能是饿蚂蝗所含有的黄酮类化合物的消炎镇痛作用,或者还有可能存在其他因素起镇痛作用尚待研究[8-14]。

炎症是一种较为常见的病症,会导致一系列的动物健康问题,进而影响养殖业的产量。因此,积极研发全新对于动物的抗炎镇痛药物具有较大的意义。试验通过采用向致炎大鼠喂食饿蚂蝗的方法,利用压板及热板测痛仪来对大鼠开展痛觉测验,以此来研究饿蚂蝗所发挥的抗炎镇痛作用[15]。试验为饿蚂蝗抗炎镇痛作用机制的研究提供初步方向,并为畜牧业饿蚂蝗治疗炎症动物而提供理论依据[16-18]。