殷世亮，张弘，贾丽娜，金戈，房丽娜，孟冉，吴祖倩，周雪茹，王露桐

（1.沈阳医学院基础医学院药理学教研室，辽宁 沈阳110034；2.沈阳药科大学生命科学与生物制药学院；3.沈阳药科大学药学院）

去甲斑蝥素（norcantharidin，NCTD）为芫青科昆虫南方大斑蝥或黄黑小斑鳌中有效成分斑蟊素的去1，2位甲基人工合成化合物，在临床上常被作为抗癌药物使用。临床研究结果表明NCTD对肝癌、食管癌及胃癌的发生、发展均有较强的治疗作用［1］，然而其对乳腺癌的治疗作用及其作用机制还尚不明确，亟待进一步阐明。已有研究表明Wnt/β-catenin通路的激活在乳腺癌的无限增殖、自我更新、黏附和迁移侵袭过程中发挥了至关重要的作用［2］。Wnt/β-catenin通路的激活可导致磷酸化β-catenin去磷酸化，从而使游离的β-catenin在胞浆中蓄积并进入细胞核，进而与Tcf/Lef家族 蛋 白（T cell factor/Lymphoid enhancer factor）形成转录复合物，启动下游靶基因包括MMP-7的转录，进而调控抗凋亡、细胞自我更新、迁移侵袭等细胞程序，导致癌症的发生与发展［3-6］。因此，本研究将考察NCTD对乳腺癌细胞MCF-7的凋亡诱导作用，并进一步考察其对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响，以期明确NCTD对乳腺癌细胞的抗癌作用机制，为其临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 人乳腺癌细胞系MCF-7（美国ATCC公司）；DMEM培养液（美国Gibco公司）；胎牛血清（美国Hyclone公司）；MTT（美国Sigma公司）；AnnexinV-FITC凋亡试剂盒（美国BioVision公司）；碘化丙啶（propidium iodide，PI）（美国Sigma公司）；β-catenin抗体、磷酸化β-catenin抗体、MMP-7抗体、β-actin抗体（美国Cell-signalling公司）；化学增强发光试剂盒（英国Amersham Biosciences公司）。去甲斑蝥素注射液由沈阳药科大学药剂教研室唐星教授惠赠。

1.2 方法