陈丽雄 王俊斌 李艳艳 徐鸿界 禹文海 马 进 杨凤梅 段素琴 杨亚平 刘 权 和占龙 赵 远

(中国医学科学院医学生物学研究所，昆明 650118)

猕猴属灵长目、类人猿亚目、猴科、猕猴属动物。雌猴3岁达到性成熟，4～5岁体成熟；雄猴 4～5 岁性成熟，4.5～5岁才允许配种[1]。达到配种条件的猕猴统称为繁殖猴。因其基因与人有97.5%的相似性[1]，71%的化合物与人类相似，猕猴被作为人类疾病动物模型广泛应用于疫苗生产、神经生理学、病毒学、心理学、传染病学、行为学、计划生育学、老年病学、肿瘤学和器官移植学等的研究[2]。黄芪多糖是中药黄芪的主要活性成分之一，黄芪多糖具有明显的免疫调节作用，它能提高淋巴细胞的吞噬能力，对某些药物及不同应激模式下的免疫功能下降，均有显著免疫增强作用[3]；并能有效改善动物肠道功能，具有一定的抑菌和抗病毒作用，在畜禽养殖中已被广泛应用。本实验通过在繁殖猕猴日粮中添加黄芪多糖，同时与未添加黄芪多糖之前对比，探讨黄芪多糖对繁殖猕猴生长性能、血液生理、生化指标及腹泻发病率的影响。从而证实黄芪多糖在繁殖猕猴饲养中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料

黄芪多糖由四川恒通动物制药有限公司提供。

1.2 实验动物

中国医学科学院医学生物学研究所自己饲养的成年实验猕猴。实验动物生产许可证号：SCXK(滇)2015-0006，公母配比为1∶6～7，以笼为单位饲养。

1.3 实验设计

在基础日粮中添加0.1%的黄芪多糖粉，每日饲喂一餐。不同年龄阶段的猕猴选取60只，分3次采血：①实验前采血一次，称体质量一次。②实验1个月后采血一次，称体质量一次。③实验3个月后采血一次，称体质量一次。统计实验前及实验1个月后猕猴的腹泻情况。基础日粮的配方组成见表1。

表1 饲料配方组成Table 1 composition of feed formula

1.4 生长性能指标测定

分别在实验前、实验1个月后、实验3个月后称体质量，计算体质量增加的情况。

1.5 血液生化、生理指标测定

在实验前对繁殖猕猴进行静脉采血，血液2 000 r/min离心20 min,吸取血清，用于测定肝脏功能、肾脏功能、微量元素。采用全自动生化分析仪(Mindray BS-200全自动生化分析仪)测定。采用全自动血液分析仪(日本Sysmex公司)检测血液生理指标。主要查看白细胞、红细胞、淋巴细胞百分数、淋巴细胞数等。

1.6 统计方法

通过Excel对实验数据进行整理，采用SPSS 24.0软件对数据进行分析。

2 结果

2.1 黄芪多糖对繁殖猕猴生长性能的影响

结果见表2，实验后1个月、3个月与实验前相比体质量都有了明显的升高。从表中可以看出所有猴子的体质量随黄芪多糖的添加时间的延长不断增加，4岁猴子实验后1个月、3个月与实验前比较，增重差异显著(P<0.05)。5～10岁猴子体质量也随黄芪多糖的添加时间而增加，实验1个月后与实验前比较差异显著(P<0.05)。实验3个月后与实验前比较没有明显差异(P>0.05)。10岁以上的猴子体质量也随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验后1个月、3个月与实验前比较，增重差异显著(P<0.05)。

表2 不同年龄阶段的繁殖猴的生长情况(kg)Table 2 growth of reproductive monkeys at different ages(kg)

2.2 黄芪多糖对繁殖猕猴血液生理指标的影响

从整体趋势来看随着黄芪多糖添加时间的延长，白细胞、淋巴细胞百分数、淋巴细胞数均逐渐升高。白细胞数实验1月后与实验前比较显著升高(P<0.05)；实验3个月后与实验前比较白细胞数也有显著升高(P<0.05)；淋巴细胞百分数实验1个月后与实验前比较，差异并不显著(P>0.05)，实验3个月后与实验前比较差异也并不显著(P>0.05)；淋巴细胞数实验1月后和实验3个月后与实验前比较差异显著(P<0.05)，见表3。

表3 繁殖猴血液生理指标检查结果Table 3 results of blood physiological examination in breeding monkeys

2.3 黄芪多糖对繁殖猕猴血液生化指标的影响

2.3.1繁殖猴肝功能检测结果：结果见表4，随着黄芪多糖添加的时间变化，谷草转氨酶的浓度不断增高，实验1个月和3个月后与实验前比较，差异均较显著(P<0.05)。谷丙转氨酶的浓度也随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前后比较差异显著(P<0.05)。间接胆红素的浓度也随添加时间的延长而增加，但实验前后比较无明显差异(P>0.05)。总胆红素的浓度也随添加时间的延长而增加，实验1个月、3个月后与实验前比较差异显著(P<0.05)。白蛋白与球蛋白比值随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前后比较差异显著(P<0.05)。

表4 繁殖猴肝功能指标检测结果Table 4 results of liver function test in breeding monkeys

2.3.2繁殖猴肾功能检测结果：结果见表5，从表中可以看出尿素随黄芪多糖添加的时间延长不断增高，实验后3个月与实验前比较差异显著(P<0.05)。血糖随着黄芪多糖的添加时间的延长不断降低，实验前与实验1个月后比较差异显著(P<0.05)，实验前与实验3个月后比较无明显差异(P>0.05)。

表5 繁殖猴肾功能指标检测结果Table 5 results of renal function test in breeding monkeys

2.3.3繁殖猴血脂检测结果：结果见表6，血脂随着黄芪多糖添加时间的延长而增加，总胆固醇实验前与实验1个月后比较差异较显著(P<0.05)，实验前与实验3个月后比较无明显差异(P>0.05)。甘油三酯随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前与实验1个月后、实验3个月后比较差异显著(P<0.05)。高密度脂蛋白和低密度脂蛋白均随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前与实验1个月后、实验3个月后比较差异较显著(P<0.05)。

表6 繁殖猴血脂检测结果Table 6 results of blood lipid test in breeding monkeys

2.3.4繁殖猴血液微量元素的检测结果：结果见表7，镁随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前与实验1个月后、实验3个月后比较差异较显著(P<0.05)。铁的含量随黄芪多糖添加时间的延长而增加，实验前与实验1个月后、实验3个月后比较差异较显著(P<0.05)。

表7 繁殖猴血液微量元素的检测结果Table 7 results of blood micronutrient test in breeding monkeys

2.3.5繁殖猴血液免疫物质的检测结果：结果见表8，除IgM外，所有免疫物质实验3个月后与实验前比较数值呈上升趋势，差异较显著(P<0.05)。

表8 繁殖猴血液免疫物质的检测结果(g/L)Table 8 results of blood immune substances in breeding monkeys(g/L)

2.4 黄芪多糖对繁殖猕猴腹泻的影响

饲养区内共84个大笼。由图1可知，实验期间以3天内腹泻笼数的平均数为一个统计点，统计结果明显看出腹泻笼数是呈下降趋势的，说明黄芪多糖对繁殖猕猴的腹泻有很好的预防及治疗效果。

图1 黄芪多糖对繁殖猕猴猴腹泻的影响Fig.1 Effect of astragalus polysaccharides on diarrhea of Breeding rhesus monkey

3 讨论

3.1 黄芪多糖对繁殖猕猴生长性能的影响

黄芪多糖作为饲料添加剂能提高饲料中营养物质的表观消化率，促进脂肪、糖类的沉积与血清总蛋白的生成，进而提高饲料利用率，提高繁殖猕猴生长性能[4]。黄芪多糖能明显改善小肠的形态结构，还能调节肠道微生物的平衡，改善肠道功能，提高营养物质利用率。黄芪多糖可增加肉仔鸡十二指肠、空肠及回肠的绒毛高度和宽度、黏膜厚度从而提高仔鸡对饲料的消化率[4]。黄芪多糖可提高仔猪的回肠消化率[5]。黄芪多糖作为饲料添加剂时，在饲料中添加至0.5%和0.7%时可以显著提高肉仔鸡的平均日增重[6]。在仔猪饲料中添加0.2%，0.4%的黄芪多糖有效提高仔猪对饲料营养物的消化率[7]。本实验中随着黄芪多糖添加时间的延长，繁殖猕猴年龄越小的体质量增重就越快，年龄偏大的体质量增重缓慢一些。

3.2 黄芪多糖对繁殖猕猴血液生理指标的影响

白细胞的数量是反应机体免疫状态的一个重要指标。有研究表明中草药制剂能增加血液中白细胞的数量[8]。黄芪具有益气健脾的作用，可以保护骨髓的功能增加外周血液的白细胞及血小板的数量从而提高免疫力。本实验中随着黄芪多糖添加时间的延长白细胞的数量不断升高。淋巴细胞数量也是机体免疫应答功能的重要细胞成分，其数量的增加也代表着机体抵抗力增强。

3.3 黄芪多糖对繁殖猕猴血液生化指标的影响

谷草转氨酶、谷丙转氨酶是动物肝细胞内参与氨基酸代谢的重要酶，正常情况下分布在肝细胞以及其它组织内，在非必需氨基酸和蛋白质分解代谢中起重要的中介作用[9]。 黄芪多糖能明显保护实验性肝损伤[10]。血糖水平降低从另一方面说明机体内合成代谢加强，表明饲喂黄芪多糖后肝脏转化以及组织细胞利用葡萄糖的能力增强了[11]。黄芪多糖具有双向调节血糖的作用，能降低葡萄糖超负荷的小鼠的血糖，能明显降低肾上腺素引起的小鼠的血糖升高反应[12]。本实验研究表明在饲料中添加黄芪多糖对繁殖猕猴的肝肾功能没有损伤，同时还具有一定的保护作用。

3.4 黄芪多糖对繁殖猴免疫力的影响

黄芪多糖能够促进动物机体免疫器官的发育增强机体免疫力[3]。黄芪多糖可以通过增加免疫器官质量来提高机体免疫力[13]可以通过激活免疫细胞功能而增强机体免疫力[14]。还可以通过促进树突状细胞成熟并特异性激活T细胞，增强树突状细胞对T细胞的抗原呈递能力，进而提高机体细胞免疫[15]。黄芪多糖通过提高血液中球蛋白/白蛋白比值，增强机体体液免疫和细胞免疫的能力，从而提高动物机体免疫能力[16]。黄芪多糖对免疫系统的调节作用范围极广，不仅能调节固有的免疫系统，还能刺激、激活单核-巨噬细胞、树突状细胞，对免疫器官、T淋巴细胞、B淋巴细胞及各种细胞因子都有调节作用，从而起到增强免疫力的作用[17]。黄芪多糖对繁殖猕猴的免疫功能有很好的调节作用。

3.5 黄芪多糖对繁殖猕猴腹泻的影响

繁殖猕猴腹泻主要是排便次数增加，形状改变，总量增加。原因可由细菌病毒感染、着凉、应激、免疫力低下、肠道菌群紊乱等原因引起。黄芪多糖有抗菌、抗病毒、防霉、防腐的作用。黄芪多糖能对多种病毒产生干扰、结合作用，也可促进巨噬细胞的吞噬作用以杀灭病毒，同时还能诱生干扰素产生抗病毒作用[12]。黄芪多糖对大肠杆菌、沙门菌、绿脓杆菌具有明显的抑制效果[18]，对志贺氏痢疾杆菌、金黄色球菌、a、b型溶链球菌肺炎双球菌都能发挥出较好的抗菌作用[19]。黄芪多糖能明显改善小肠的形态结构，提高小肠的消化率，还能调节肠道微生物菌群平衡，进而改善动物的肠道功能[3]。黄芪多糖具有免疫增强作用，其主要是促进动物胸腺、脾脏、淋巴结及各淋巴组织的增生，增强免疫器官的指数，提高淋巴细胞转化率，增强巨噬细胞的吞噬能力，提高动物机体对抗原的免疫应答能力，提高动物机体免疫力[3]。黄芪多糖对繁殖猕猴的腹泻有较明显的防治效果。

综上所述，在繁殖猕猴日粮中添加0.1%的黄芪多糖对繁殖猕猴的生长性能有改善作用，同时能提高繁殖猕猴的免疫力，降低腹泻的发病率；降低抗生素的使用率，为提高繁殖猕猴的质量，降低饲养成本起到了不可替代的作用。