马小双 蒋倩 李文艳

摘要：指出了白及作为一种传统的中药材，药用价值高，用药广泛，化学成分复杂，药理活性多样，具有良好的开发价值。利用四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠模型，研究了白及多糖的降血糖功效。通过连续给小鼠灌胃白及多糖18d后，可以在一定程度上改善糖尿病小鼠的状态，缓解多饮多食多尿及消瘦等症状，降低小鼠血糖。试验过程中主要测定了糖尿病小鼠的血糖值、体质指数、负重游泳时间、免疫器官湿重等各项指标。结果表明：白及多糖能够保护小鼠免疫器官，增加小鼠脾脏和胸腺的湿重，延长小鼠负重游泳的时间，白及多糖具有抗疲劳功效和增强机体免疫力的功效。

关键词：抗疲劳;降血糖;增强免疫力

中图分类号：TS210 文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2019）20-0153-03

1引言

白及是兰科植物白及[BletiUastriata（Thunb.）Reichb.f.]的干燥块茎，别名良姜、紫兰，其根白色，连及而生，故日白及，其性味苦、甘、涩，平、微寒，主归肺经、胃经、肝经。具有补肺、止血、消肿、生肌、敛疮的功效。主要用于治疗肺伤咳血、衄血、金疮出血、痈疽肿毒、溃疡疼痛等症。素有“外科最善”之称，是我国传统止血药，历史悠久。临床上广泛用于治疗咳血、疮疡肿毒、外伤出血、吐血、皮肤皲裂、肺结核、溃疡病出血等病症，疗效突出。

现代药理研究证实，除了上述作用之外，白及还具有抑制肿瘤血管生成、抗感染、抗疲劳、抗氧化、防腐、促进伤口凝血、保护胃黏膜、促进机体伤口愈合的功效。人们研究发现，白及的假鳞茎含有大量易溶于水的多糖，其主要功能性成分是葡萄甘露聚糖，白及多糖具有十分特殊的黏性。白及多糖由甘露糖和葡萄糖两种单糖组成，不含有糖醛酸，提纯后的白及多糖为白色粉末状，在热水和偏碱性溶液中易溶解，在冷水中不易溶解。白及水溶液的粘性很大，且粘度随其分子量增加而增加。白及的主要化学成分是联节类、菲类及其衍生物，此外还含有少量挥发油、黏液质、白及甘露聚糖以及淀粉、葡萄糖等。白及多糖具有生物活性、生物相容性，且毒性较低，在医药领域被广泛应用，随着研究的深入，白及的功能特效也越来越多地被人们发现。

近年来不断研发白及的新型制剂，其临床疗效十分显著。糖类是自然界中最多的天然有机化合物，也是重要的生物高分子和重要的信息分子。多糖及糖复合物在自然界分布广泛，功能多种多样，它们参与了细胞各种生命活动。有的多糖具有特殊生物活性，能够显著降低动物机体的血糖，可作为一种机体免疫调节剂，没有毒副作用，被临床和疫苗广泛应用。多糖常与其它大分子共同存在于植物细胞中，可利用多糖不溶于有机溶剂的性质在提取液中加入乙醇溶液使白及多糖从提取液中沉淀出来，初步达到分离纯化的目的。

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1原料与试剂

白及购于文山市三七农贸市场、昆明种小白鼠、四氧嘧啶（上海伊卡生物技术有限公司）、盐酸二甲双胍片（河北医科大学制药厂）、无水乙醇、蒸馏水、生理盐水。

2.1.2试验仪器与设备

干燥箱（上海以恒科学仪器有限公司）、R-1005型旋转蒸发仪（郑州长城科技有限公司）、XL5A离心机（湖南湘立科学仪器有限公司）、KQ-300E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、586型鱼跃血糖仪（上海鱼跃医疗设备有限公司）、HH-s2s恒温水浴锅（金坛市大地自动化仪器厂）、烧杯、量筒、滴管、电子天平、分析天平、玻棒、抽滤装置、滤纸、锥形瓶、pH计、小鼠灌胃器、鼠笼。

2.2实验方法

2.2.1小鼠降血糖实验

2.2.1.1建模

实验前将26只雌雄各半的昆明种小鼠放在室温和相对湿度稳定的实验室内适应性喂养4d，小鼠给予营养饲料喂养以及自由饮水。4d后将其分为对照组和糖尿病模型组。对照组给以营养饲料喂养及自由饮水，糖尿病模型组禁食12h后腹腔注射药物四氧嘧啶，剂量为200mg/kg，84h后，小鼠断尾采血测定糖，当数值大于11.1mmoL/L时则表明糖尿病小鼠造模成功，可用于接下来的药理实验。实验期间每天称量小鼠的体重，并密切观察小鼠的状态。

2.2.1.2分组及给药

选取造模成功的患糖尿病小鼠20只，将小鼠随机分为5个组，每个小组4只，即糖尿病模型组、盐酸二甲双胍组、白及多糖低剂量组、白及多糖中剂量组、白及多糖高剂量组。分组后，在每天的固定时间段8：OO～10：00给小鼠灌胃，实验周期为18d。实验期间，小鼠给以正常营养饲料喂养，每天每只3～5g，自由摄食饮水，室内确保通风，温度和相对湿度保持稳定。白及多糖高剂量、中剂量、低剂量组每天分别灌胃白及多糖400mg/kg、200mg/kg、100mg/kg，盐酸二甲双胍组每天灌胃剂量为200mg/kg1，用生理盐水溶解，灌胃量为0.2mL/10g，对照组與模型组灌胃等体积生理盐水，连续灌胃18d。在未次给药前小鼠禁食10h（不禁水），给药2h后断尾采血用鱼跃血糖仪测小鼠血糖。

2.2.2小鼠力竭游泳实验

取小鼠16只，雌雄各半，放在室温和相对湿度稳定的实验室内适应性喂养4d，小鼠给予正常饲料喂养以及自由饮水，4d后将小鼠随机分成4个组，每个小组4只，白及多糖高剂量、中剂量、低剂量组每天分别灌胃白及多糖剂量为400mg/kg、200mg/kg、100mg/kg，用生理盐水溶液溶解，灌胃剂量为0.4mL/20g，对照组小鼠灌胃0.4mL/20g体积生理盐水，持续灌胃15d。末次给药30min后在小鼠尾部束小鼠体重10%的物体，并分别放人水温25土1℃，水深12cm，长、宽、高为40 cmX 30cmX 20cm的玻璃缸内游泳，立即计时并注意观察，当小鼠头部沉入水中12s内不能浮出水面即视为体力耗竭，应立即停止计时，并记录小鼠游泳时间，与对照组小鼠比较并进行统计学处理。按下列公式计算存活时间延长率：

延长率=实验组小鼠力竭游泳时间/对照组小鼠力竭游泳时间-1

2.2.3小鼠脏器指数测定

采用2.2.2韵实验小鼠进行后续药理实验，将小鼠处死后立即解剖，取其胸腺和脾脏，用滤纸吸干胸腺和脾脏表面的血液，在分析天平上称湿重，按下列公式计算脏器指数：

脏器指数=器官重量（mg）/小鼠体重（g）×100%

2.2.4数据处理

应用SPSS19.0数据分析软件进行统计学分析，计量资料正态分布用均数加减标准差（x±s）来表示，采用单变量方差分析和单因素方差分析方法，当P<0.05为具有显著差异，有统计学意义。

3结果与分析

3.1糖尿病小鼠血糖水平变化

血糖升高且空腹血糖含量>11.1mmoL/L是糖尿病最顯著的标志。诊断糖尿病的主要依据是以空腹血糖值升高超过11.1mmoL/L。因此本试验以试验前后血糖的高低值作为主要的检测依据来探讨白及多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用。

小鼠血糖水平变化如表1所示，模型组与对照组相比，各糖尿病组小鼠的血糖值显著升高（P<0.05），且血糖值均高于11.1mmoL/L，表明糖尿病小鼠动物造模成功。灌胃18d后，模型组的血糖值基本上没有变化，而其它给药组的血糖均有降低，药物组与模型组小鼠比较，白及多糖低剂量、中剂量、高剂量各组的小鼠空腹血糖水平显著降低（p<0.05），结果表明，白及多糖能降低四氧嘧啶诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖。

3.2白及多糖对小鼠游泳时间的影响

如表2白及多糖对小鼠力竭游泳时间的影响所示，各组小鼠力竭游泳时间均比对照组显著延长（P<0.05）。其中对照组和实验组相比，白及多糖低剂量、中剂量、高剂量组小鼠游泳时间被延长（P<0.05），高剂量组小鼠游泳时间的延长率为59.83%，中剂量组小鼠游泳时间的延长率为38.63%，低剂量组小鼠游泳时间延长率为18.79%，明显延长了小鼠的游泳时间，白及多糖具有抗疲劳的作用。

3.3小鼠脏器指数测定结果

如表3白及多糖对小鼠免疫器官指数的影响所示，各个实验组小鼠免疫器官指数与对照组相比，各个实验小组的脾脏指数和胸腺指数都不同程度的升高（P<0.05），白及多糖高剂量组的效果最好，脾脏指数和胸腺指数分别提高30.88%、48.58%;中剂量组小鼠的脾脏指数和胸腺指数分别提高了29.90%、39.0o%;低剂量组小鼠的胸腺指数提高了9.57%，表明白及多糖能够促进糖尿病小鼠胸腺和脾脏的生长发育，能增强小鼠免疫力。

4结论与讨论

灌胃18d后，模型组的血糖值基本上没有变化，而其它给药组的血糖均有所下降，与模型组小鼠比较，多糖低剂量组、中剂量组、高剂量组的小鼠空腹血糖水平显著降低（P<0.05），白及多糖对四氧嘧啶诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠具有一定的降血糖做用。白及多糖对实验糖尿病模型小鼠的影响是广泛的，都表明白及多糖能有效改善糖尿病模型小鼠的相关各项指标，减轻小鼠的病情，阻止或延缓并发症的出现。深人研究白及多糖防治糖尿病及并发症的机制，将其作为防治糖尿病及并发症的有效制剂开发，具有重要的现实意义。

常用疲劳的评价方法有两个：运动耐力实验和生化指标检测。提高运动耐力是缓解疲劳能力最有力的表现，小鼠负重游泳实验常用来测定小鼠的疲劳状况，可客观的反映小鼠运动疲劳的程度，负重力竭游泳时间常常被作为反映运动耐力的重要指标，而且运动耐力下降又是机体疲劳最直接的表现，结果表明，白及多糖可以有效延长小鼠的负重游泳时间，高剂量组游泳时间的延长率为59.83%，中剂量组游泳时间的延长率为38.63%，低剂量组游泳时间延长率为18.79%，白及多糖具有一定的抗疲劳的作用。

脾脏、胸腺是动物体内主要的免疫器官，免疫器官指数反应了动物免疫器官的发育和免疫细胞的功能情况，客观上体现了机体的非特异性免疫能力。实验组与正常对照组相比较，各个给药组的脾脏指数和胸腺指数都有不同程度的升高（P<0.05），白及多糖高剂量组效果最好，脾脏指数和胸腺指数分别提高30.88%、48.58%;中剂量组小鼠的脾脏指数和胸腺指数分别提高了29.90%、39.00%;低剂量组小鼠的胸腺指数为9.57%，白及多糖具有增强机体免疫力的功效。