罗万蓉

慢性乙型肝炎(CHB)为我国常见感染性肝病，乙肝病毒e抗原(HBeAg)阳性CHB患者具有病程短、病毒复制活跃等特点，使其治疗较为困难[1]。聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)是一种强效抗病毒药物，能抑制病毒复制，具有较高的HBeAg血清转换率，对控制复发有积极意义[2]。然而，经PEG-IFN治疗后，仍有部分患者应答不佳，未能获得良好疗效[3]，故及时评估患者病情发展及疗效非常重要。但CHB患者治疗周期较长，且HBeAg血清转换转化情况在治疗短期难以观察，因此，探寻一种及时的疗效评估指标很有必要。唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(Siglec-7)是一种主要表达于自然杀伤细胞(NK细胞)表面的跨膜蛋白，能调节NK细胞的细胞毒性，与NK细胞功能密切相关。而NK细胞作为免疫系统重要组成部分，在抗病毒感染中发挥重要作用[4]。基于此，本研究分析了Siglec-7评估PEG-IFN治疗CHB的效果，探讨其作为预测或评价PEG-IFN治疗CHB效果指标的可行性。

1 对象与方法

1.1 研究对象 回顾性分析2016年3月～2018年3月在医院行PEG-IFN治疗的68例CHB患者（CHB组）临床资料，纳入标准：符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)》[5]的 CHB 诊断标准；HBeAg阳性；年龄18～65岁。排除标准：合并丙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒等其他病毒感染；合并恶性肿瘤；伴自身免疫性肝炎、肝硬化等其他肝病；吸毒、酗酒、癫痫史；精神疾病史者。另将医院同期62例体检健康者作为对照组。CHB组女性23例，男性45例；年龄 28～54（41.54±8.21）岁。 对照组女性 25 例，男性37 例；年龄 27～54（40.29±8.14）岁。 两组年龄、性别比较无显著差异（P＞0.05）。

1.2 治疗方法及疗效评价标准 CHB组均给予Peg-IFNα-2a 皮下注射，180 μg/次，1 次/w，连续治疗48 w后，评价临床疗效。显效：HBeAg阴转伴血清转换，且HBV DNA阴转；有效：HBeAg阴转，而血清未转换，HBV DNA阴转；无效：未达到上述标准或病情加重。根据临床疗效评价结果[6]，将显效与有效者纳入有效组，无效者纳入无效组。

1.3 检测指标 （1）HBeAg阴转率和血清转换率、HBV DNA阴转率：治疗48 w后，使用化学发光法测量患者空腹血清HBeAg、e抗体(抗-HBe)水平，以 HBeAg 0～1 lgs/拷贝为阴性， 抗 -HBe＞1 lgs/拷贝为阳性，以HBeAg阴性伴抗-HBe阳性为血清学转换；利用聚合酶链式反应(PCR)测量HBV DNA水平，以 HBV DNA＜500拷贝/ml为阴性。（2）NK 细胞计数：通过聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法（试剂购自美国Hyclone公司）获得患者外周血单个核细胞，采用FACSCantoⅡ流式细胞仪（美国BD公司）检查NK细胞计数。（3）Siglec-7在NK细胞表面表达情况：将聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法获得的单个核细胞，加入抗-Siglec-7抗体 （购自美国eBioscience公司），检测Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率。

1.4 统计学方法 应用SPSS 19.0统计软件分析，计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CHB组治疗效果 CHB组治疗后，HBeAg阴转 28例（41.18%），HBeAg血清转换 22例（32.35%），HBV DNA阴转40例（58.82%）；治疗效果，显效21例（30.88%），有效 7例（10.30%），共 28例（41.18%）纳入有效组；无效40例（58.82%），纳入无效组。

2.2 两组NK细胞计数和Siglec-7表达情况比较治疗48 w后，CHB组NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均较治疗前升高（P＜0.05），但均低于对照组（P＜ 0.05，表 1）。

表1 两组NK细胞计数和Siglec-7表达情况比较（%）

2.3 有效组与无效组NK细胞计数和Siglec-7表达情况比较 治疗前，有效组NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均高于无效组（P＜0.05）；治疗48 w后，两组NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均较治疗前升高（P＜0.05），且有效组均高于无效组（P＜ 0.05，表 2）。

表2 有效组与无效组NK细胞计数和SigIec-7表达情况比较（%）

3 讨论

PEG-IFN为目前治疗CHB的常用抗病毒药物，可与受乙型肝炎病毒(HBV)感染的肝细胞结合，激活肝细胞内抗病毒蛋白及其激酶合成，分解病毒mRNA，发挥抑制病毒复制作用[7]。但治疗无效者并不少见，因此，寻找及时评估CHB治疗效果指标是研究热点。NK细胞是机体免疫系统重要组成部位，可识别并杀伤病毒感染细胞及肿瘤细胞，也能参与CHB患者免疫功能，且随CHB患者免疫功能的抑制而降低[8]。临床研究发现，Siglec-7作为NK细胞表面抑制性分子，在NK细胞活化、功能较强的亚群中可高表达，与NK细胞功能呈显著相关性[9]。对此，本研究就Siglec-7在NK细胞表面表达情况评估PEG-IFN治疗CHB效果的可行性展开分析，以探寻预测CHB治疗效果的新型指标，为临床制定及调整CHB治疗方案提供新思路。

本研究结果显示，CHB组治疗后，HBeAg阴转率 41.18%，HBeAg血清转换率 32.35%，HBV DNA阴转率58.82%，但治疗无效达58.82%。提示PEGIFN治疗效果仍需加强监测，及时发现治疗无效者。另外，CHB组治疗前后NK细胞计数和Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均低于对照组，分析其原因可能与CHB患者受HBV感染，免疫系统严重受损，NK细胞数量显著下降，且细胞活性也受到抑制，使NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率降低。而治疗48 w后，CHB组NK细胞计数和Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均较治疗前升高，表明PEG-IFN可在一定程度上控制或缓解病毒感染对免疫功能的抑制作用，改善机体免疫功能，使NK细胞活性增强、数量增加。

此外，本研究还发现，有效组治疗后NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均高于无效组，证实Siglec-7表达情况与PEG-IFN治疗CHB效果有关。治疗有效者免疫功能改善效果好，机体NK细胞得以显著上调，细胞功能也增强，使NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率处于较高水平。不仅如此，有效组治疗前NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率也高于无效组，说明治疗前免疫系统抑制较少者PEG-IFN治疗效果好。提示NK细胞计数及Siglec-7表达情况可作为PEGIFN治疗效果的预测指标，利于临床尽早选择合适治疗方案。

总之，CHB患者NK细胞计数及Siglec-7阳性表达率均低于健康人群，治疗有效者在治疗前后均具有较高的NK细胞计数及Siglec-7阳性表达率，临床可根据CHB患者NK细胞计数和Siglec-7表达水平预测CHB疗效。