卓严玲 颜秋 邓启霞

摘要：热休克蛋白（Hsp）是在各种生物体内广泛分布的一类具有高度保守性、短时性、多样性等特点的热应激蛋白质，参与细胞的多种生理生化活动。已有研究表明，Hsp40在多种病毒感染细胞的过程中发挥重要作用，但其对猪圆环病毒2型（PCV2）复制的影响及机制尚不清楚。为了探究Hsp40在PCV2感染中的生物学功能，在克隆猪Hsp40基因CDS区全基因序列的基础上，采用双酶切位点法分别构建猪Hsp40基因的过表达载体和RNA干扰载体。该研究为猪Hsp40转基因细胞株的构建搭建好平台，同时也为挖掘猪Hsp40对PCV2感染的响应机制提供极大的便利。

关键词：猪热休克蛋白40;过表达载体;RNA干扰载体;猪圆环病毒2型

中图分类号： S852.65+9.2; Q78  文献标志码： A  文章编号：1002-1302（2019）17-0063-04

猪圆环病毒2型是引起猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）的主要病原体[1-2]，我国于2001年首次报道该病，目前已成为危害我国规模化猪场养猪生产的重要传染病之一[3-4]。然而，直到现在人们对PCV2的复制机理和致病机制仍然不是很清楚，尤其对PCV2感染过程中病毒DNA和蛋白与宿主胞内蛋白之间的相互作用网络及其所蕴含的生物学意义更是知之甚少。PCV2作为能够感染哺乳动物的最小病毒之一，其基因组的编码能力有限，必须依赖于宿主细胞内的酶类才能完成复制增殖，因此PCV2不得不借助其病毒DNA和蛋白与宿主细胞内的各种基因相互作用来调控宿主免疫应答，如导致细胞因子分泌失调、免疫抑制和疾病等，从而实现其对病毒复制和致病机制的调控[5]。……