王焙，张登科，史咏梅，吴迪迪，李勇勇，娄永江

(宁波大学 食品与药学学院，浙江 宁波，315211)

抗菌肽是一种新型的生物防腐剂，易被人体消化水解[1]，且具有无毒副作用、无污染、无残留、热稳定性强等优点[2]。目前研发的溶菌酶、乳酸链球菌素[3]等对革兰氏阳性菌具有明显抗菌性，已广泛应用于陆生动物食品中。但对革兰氏阴性致病菌占优势的海洋食品来说，相关报道较少[4]。

我国渔业资源丰富，近年来以海洋中上层鱼类为原料生产鱼罐头的产业不断壮大，在加工过程中产生大量的暗色肉，其富含丰富的蛋白质及碱性氨基酸[5]，适合开发成抗菌肽。本文以鲣鱼暗色肉为原料，对其进行酶解优化[6]，并对酶解产物粗肽进行分离纯化和抑菌活性测定，以期获得一种具有产业化前景、抑制海洋食品中革兰氏阴性致病菌的抗菌肽，为海洋中上层鱼类暗色肉的精深加工利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

鲜冻鲣鱼(Katsuwonuspelamis)，市售；金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)ATCC25923、大肠杆菌(Escherichiacoli)ATCC25922、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、希瓦氏菌(Shewanella)，南京茂捷微生物科技有限公司；碱性蛋白酶(地衣芽胞杆菌产)、胰蛋白酶、中性蛋白酶(枯草芽孢杆菌产)、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶(黑曲霉产)、胃蛋白酶，广西南宁庞博生物工程有限公司；MH肉汤培养基、LB培养基，杭州微生物科技有限公司；牛血清白蛋白，生工生物工程股份有限公司；干酪素，上海麦克林生化科技有限公司；酪氨酸，中国食品药品检定研究院；福林酚，上海国药试剂集团；NaCl(分析纯)、磷酸盐缓冲液(PBS)、NaOH(分析纯)、HCl(分析纯)；……