党瑞红，李晓慧，董莉

冠心病（coronary heart disease，CHD）是严重威胁人类健康的心血管疾病，主要病理基础是全身大、中动脉粥样硬化，且炎性反应、免疫反应均有参与。早期识别并干预CHD 是预防急性心血管事件的重要方法。血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）是目前作用最强的脂质递质和血小板活化刺激因子，可促进血小板聚集，诱导血栓形成［1］。有研究表明，PAF 与冠心病有关，可直接参与动脉粥样硬化发生发展，能独立预测急性冠状动脉事件［2］。淋巴细胞中活化T 细胞核因子c1（nuclear factor of activated T cells c1，NFATc1）是一种具有多向调节作用的核转录因子，其与动脉粥样硬化的发生密切相关［3-5］。但目前少有血清PAF、NFATc1 水平对CHD 诊断价值的研究，本研究旨在探讨血清PAF、NFATc1 水平与CHD、冠状动脉病变程度及CHD 类型的关系，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2015 年12 月—2017 年12 月内蒙古医科大学附属医院住院并行冠状动脉造影（coronary angiography，CAG）检查的患者195 例，根据CAG 检查结果分为非CHD 组51 例（无明显冠状动脉狭窄或冠状动脉狭窄率＜50%）和CHD 组144 例（至少1 支冠状动脉狭窄率≥50%）。非CHD 组患者有类似心绞痛症状，但心电图、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白T水平在参考范围；CHD 组患者均符合2013 年欧洲心脏病学会（ESC）指南中CHD 的诊断标准［6］。排除标准:（1）合并冠状动脉以外的心脏病、恶性肿瘤、外周血管病变者；（2）合并严重肾功能不全〔肾小球滤过率＜60 ml·min-1·1.73（m2）-1〕者；（3）合并急慢性感染、自身免疫性疾病者；（4）实验室检查指标和影像学检查结果不全者。根据冠状动脉病变严重程度将CHD 患者分为轻度组36 例、中度组68 例、重度组40 例。根据CHD 类型将所有CHD 患者分为稳定型心绞痛（SAP）组69 例和急性冠脉综合征（ACS）组75 例。本研究经内蒙古医科大学附属医院医学伦理委员会审核批准，所有患者知情同意。

1.2 观察指标

1.2.1 一般资料及血脂指标、肌酸激酶（CK）、CK-MB 收集所有患者的一般资料〔包括年龄、性别、吸烟史（过去20 年均有吸烟，吸烟量＞20 包/年）、饮酒史（过去20 年均有饮酒，饮酒量≥50 g/月）、糖尿病病史、高血压病史、高脂血症病史、脑血管疾病病史、心率、血压〕、血脂指标〔包括总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）〕、CK、CK-MB。

1.2.2 血清PAF、NFATc1 水平 采集所有患者清晨空腹静脉血3～5 ml，置于室温中30 min，待自然凝固后取上清液于离心管，4 ℃下3 000 r/min 离心10 min（离心半径15 cm），采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清PAF、NFATc1 水平，PAF 试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，NFATc1 试剂盒购自大连泛邦化工技术有限公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.2.3 冠状动脉病变严重程度 按照Judkins 法［7］经桡动脉或股动脉进行CAG 检查，记录冠状动脉病变部位、累及冠状动脉支数、冠脉狭窄程度，并计算SYNTAX积分；以SYNTAX 积分0～22 分为轻度冠状动脉病变，SYNTAX 积分23～32 分为中度冠状动脉病变，SYNTAX积分＞32 分为重度冠状动脉病变［8-9］。

1.3 统计学方法 采用SPSS 25.0 软件进行数据分析，经K-S 检验符合方差齐性和正态分布的计量资料以（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验，两组间比较采用两独立样本t检验；计数资料分析采用χ2检验；绘制ROC 曲线以评价血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1 水平对CHD 的诊断价值及血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB 水平对ACS 的诊断价值。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CHD 组与非CHD 组患者一般资料、血脂指标及血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较 CHD 组与非CHD 组患者年龄≥65 岁者所占比例、心率、收缩压、舒张压比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；CHD 组患者男性比例，有吸烟史、饮酒史、糖尿病病史、高血压病史、高脂血症病史、脑血管疾病病史者所占比例及血 清TC、TG、LDL-C、CK、CK-MB、PAF、NFATc1水平高于非CHD 组，血清HDL-C 水平低于非CHD 组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

2.2 非CHD 组、轻度组、中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较 非CHD 组、轻度组、中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；轻度组、中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平高于非CHD 组，中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平高于轻度组，重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平高于中度组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表2）。

2.3 非CHD 组、SAP 组、ACS 组患者血清CK、CKMB、PAF、NFATc1 水平比较 非CHD 组、SAP 组、ACS 组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；SAP 组、ACS 组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平高于非CHD 组，ACS 组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平高于SAP 组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表3）。

表2 非CHD 组、轻度组、中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较（）Table 2 Comparison of serum levels of CK，CK-MB，PAF and NFATc1 in non-CHD group，mild group，moderate group and severe group

表2 非CHD 组、轻度组、中度组、重度组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较（）Table 2 Comparison of serum levels of CK，CK-MB，PAF and NFATc1 in non-CHD group，mild group，moderate group and severe group

注:与非CHD 组比较，aP＜0.05；与轻度组比较，bP＜0.05；与中度组比较，cP＜0.05

组别 例数 CK（U/L） CK-MB（U/L） PAF（μg/L） NFATc1（ng/L）非CHD 组 51 102.54±16.37 15.21±3.06 6.30±2.47 23.58±4.11轻度组 36 192.35±21.53a 32.35±9.58a 7.26±2.76a 27.03±5.21a中度组 68 241.04±30.92ab 53.15±10.12ab 10.35±3.29ab 30.26±7.25ab重度组 40 372.38±39.57abc 65.07±13.65abc 12.91±3.75abc 36.19±9.69abc F 值 19.532 24.135 26.531 28.546 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

表3 非CHD 组、SAP 组、ACS 组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较（）Table 3 Comparison of serum levels of CK，CK-MB，PAF and NFATc1 in non-CHD group，SAP group and ACS group

表3 非CHD 组、SAP 组、ACS 组患者血清CK、CK-MB、PAF、NFATc1 水平比较（）Table 3 Comparison of serum levels of CK，CK-MB，PAF and NFATc1 in non-CHD group，SAP group and ACS group

注:SAP=稳定型心绞痛，ACS=急性冠脉综合征；与非CHD组比较，aP＜0.05；与SAP 组比较，bP＜0.05

组别 例数 CK（U/L） CK-MB（U/L） PAF（μg/L） NFATc1（ng/L）非CHD 组 51 102.54±16.37 15.21±3.06 6.30±2.47 23.58±4.11 SAP 组 69 206.54±28.64a 31.52±9.05a 8.73±3.86a 24.61±4.96a ACS 组 75 319.46±35.42ab 69.42±13.75ab 11.72±2.69ab 37.07±9.50ab F 值 16.542 21.054 13.264 26.354 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.4 血清 PAF、NFATc1、PAF+NFATc1 水平对CHD 的诊断价值 绘制ROC 曲线发现，血清PAF、NFATc1、PAF+ NFATc1 水平诊断CHD 的曲线下面积（AUC）分别为0.821、0.755、0.871（见表4、图1）；血清PAF+NFATc1 水平诊断CHD 的AUC 大于血清PAF、NFATc1 水平，差异有统计学意义（Z 值分别为2.351、2.467，P 值分别为0.015、0.008）。

2.5 血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB水平对ACS 的诊断价值 绘制ROC 曲线发现，血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB 水 平 诊断ACS 的AUC 分 别 为0.936、0.834、0.979、0.753、0.760（见表5、图2）；血清PAF、NFATc1 水平诊断ACS 的AUC 大于血清CK（Z 值分别为3.261、3.245，P＜0.01）、CK-MB 水平（Z 值分别为2.634、2.515，P 值分别为0.011、0.010），差异有统计学意义；血清PAF+NFATc1 水 平 诊 断ACS 的AUC 大 于 血 清PAF、NFATc1 水平，差异有统计学意义（Z 值分别为2.031、2.725，P 值分别为0.036、0.009）。

表4 血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1 水平对CHD 的诊断价值Table 4 Diagnostic value of serum levels of PAF，NFATc1 and PAF+NFATc1 on CHD

表5 血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB 水平对ACS的诊断价值Table 5 Diagnostic value of serum levels of PAF，NFATc1，PAF+NFATc1，CK and CK-MB on ACS

图1 血清PAF、NFATc1、PAF+ NFATc1 水平诊断CHD 的ROC 曲线Figure 1 ROC curve for serum levels of PAF，NFATc1 and PAF+NFATc1 in diagnosing CHD

图2 PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB 诊断ACS 的ROC曲线Figure 2 ROC curve for serum levels of PAF，NFATc1，PAF+NFATc1，CK and CK-MB in diagnosing ACS

3 讨论

炎性反应在动脉粥样硬化发生发展、斑块破裂、血栓形成的病理过程中均有重要作用［10］。PAF 是一种具有多重潜在生物学作用的内源性磷脂，是中性粒细胞、血小板、肥大细胞、内皮细胞、巨噬细胞等在炎性反应、免疫反应、氧化反应等刺激下合成分泌［11］。本研究结果显示，CHD 组患者血清PAF 水平高于非CHD 组，表明PAF 可能参与CHD 的发生；分析其发生机制可能是PAF 与血小板质膜外表面特异性PAF 受体结合，并通过G 蛋白介导信号传导通路而激活三磷酸鸟苷酶和磷酸肌醇特异性磷脂酶C，进而诱导血小板活化，促进血小板在冠状动脉内黏附、聚集、释放炎性递质，进而使冠状动脉粥样硬化发生发展［12-14］；另一方面，PAF 可在巨噬细胞向泡沫细胞转化时促进动脉粥样硬化进程。海祺旻等［2］研究报道，PAF 与CHD 患者Gensini 积分呈正相关；付光学［1］认为，PAF 参与CHD 患者粥样硬化斑块形成过程，且与不稳定斑块有关。本研究结果显示，轻度组、中度组、重度组患者血清PAF 水平高于非CHD 组，中度组、重度组患者血清PAF 水平高于轻度组，重度组患者血清PAF 水平高于中度组，表明血清PAF 水平与冠状动脉病变严重程度有关，冠状动病变程度越重则血清PAF 水平越高。

NFATc1 在T 细胞、B 细胞等多种免疫细胞中呈高表达，在炎性反应中可诱导细胞因子并增强其他基因转录调控［15］，CHD 是一种慢性低度炎性反应，但NFATc1 在CHD 发生过程中起何种作用尚待探讨。本研究结果显示，CHD 组患者血清NFATc1 水平高于非CHD 组，分析其原因可能是CHD 患者冠状动脉不稳定斑块激发炎性反应，导致T 细胞活化扩增，胞质中Ca2+水平升高，启动促分裂素原活化蛋白激酶级联反应，上调NFATc1 核内表达，进而使血清NFATc1 水平明显升高［16］；有研究表明，NFATc1 通过调控炎性因子转录而参与动脉粥样硬化过程［17］，此外其磷酸化后可进入细胞核参与T 细胞分化、活化过程，从而发挥细胞免疫调控作用，诱导多种炎性因子转录，加速动脉粥样硬化进程；动脉粥样硬化斑块可诱导炎症刺激分子OX40-OX40L 信号激活，促进T 细胞表面NFATc1 活化，引起炎症级联反应，调控动脉粥样硬化斑块形成［18-20］。本研究结果显示，轻度组、中度组、重度组患者血清NFATc1 水平高于非CHD 组，中度组、重度组患者血清NFATc1 水平高于轻度组，重度组患者血清NFATc1水平高于中度组，提示血清NFATc1 水平与冠状动脉病变严重程度有关，冠状动脉病变严重程度越重则血清NFATc1 水平越高。徐良洁等［21］研究表明，CHD 患者血清NFATc1 水平与血管内超声分析斑块性质有关，NFATc1 水平越高则斑块性质越不稳定，ACS 发生风险越高。

CAG 是诊断CHD 的“金标准”，但其具有创伤性。本研究结果显示，血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1水平诊断CHD 的AUC 分别为0.821、0.755、0.871，且血清PAF+NFATc1 水平诊断CHD 的AUC 大于血清PAF、NFATc1 水平，提示血清PAF、NFATc1 水平对CHD 具有一定诊断价值，且二者联合对CHD 的诊断价值较高，可作为筛查及初步诊断CHD 的参考指标；但由于血清PAF、NFATc1 水平易受年龄、性别、肾功能等多种因素影响，因此临床诊断CHD 时仍需结合患者病情。本研究结果还显示，血清PAF、NFATc1、PAF+NFATc1、CK、CK-MB 水平诊断ACS 的AUC 分别为0.936、0.834、0.979、0.753、0.760，且血清PAF、NFATc1 水平诊断ACS 的AUC 大于血清CK、CK-MB水平，血清PAF+NFATc1 水平诊断ACS 的AUC 大于血清PAF、NFATc1 水平，提示血清PAF、NFATc1 水平对ACS 亦具有一定诊断价值，且二者联合对ACS 的诊断价值较高。

综上所述，血清PAF、NFATc1 水平与CHD、冠状动脉病变严重程度及CHD 类型有关；血清PAF、NFATc1 水平对CHD 及ACS 均具有一定诊断价值，且二者联合对CHD 及ACS 的诊断价值较高，由于二者检测简便、经济、可重复性好，因此可作用辅助诊断CHD 及判断冠状动脉病情严重程度的参考指标；但本研究为回顾性研究且未能动态检测血清PAF、NFATc1水平在CHD 发生发展过程中的变化，其具备最佳诊断效能的检测时间点等仍需进一步研究证实。

作者贡献：党瑞红进行文章构思、结果分析与解释并撰写论文、负责文章的质量控制；党瑞红、李晓慧、董莉进行研究实施与可行性分析、资料收集整理、论文修订；李晓慧、董莉对文章整体负责、监督管理。

本文无利益冲突。